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第三代端粒酶缺失小鼠皮肤表皮干细胞分离培养特性观察 (1).pdf

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762 TianjinMedJAugust2014,Vo1.42No.8 , 实验研究 第三代端粒酶缺失小鼠皮肤表皮干细胞分离培养 特性观察 张俊伶 黄 颂 路 璐 李德冠 吴红英 孟爱民 摘【要】 目的 观察第三代端粒酶缺失(G3Terc一)小鼠与野生型(wT)小鼠皮肤表皮干细胞数目及功能差异。 方法 利用流式细胞术对皮肤表皮干细胞进行数 目分析及分选;实时定量PCR方法检测p21基因表达;表皮干细胞 克隆形成数 目检测细胞 自我更新能力。结果 wT小 鼠基底部表皮干细胞与基底部上层表皮干细胞比例分别为 (9.56~1.O6)%和(1.22~0.08)%,在G3Terc一小鼠中这两部分细胞 比例分别为(17.36~3.56)%和 (2.92~0.72)%; G3Terc一小鼠p21相对表达水平为wT小鼠的6.4倍 ;wT小鼠每104个表皮干细胞能够形成(280.20~29.81)个克隆, G3Terc小 鼠每 104表皮干细胞仅能够形成 (29.28~5.24)个克隆,以上结果差异均有统计学意义(均P0.05)。 结论 与wT小鼠比较,G3Terc一小鼠皮肤表皮干细胞出现衰老性的损伤。 【关键词】 小民基因敲除;皮肤衰老;干细胞;端粒,末端转移酶 【中图分类号】 Q255 【文献标志码】A D【OI】 10.3969~.issn.0253-9896.2014.08.008 lsolationandCultureofEpidermaIStem CellsfrOm theThirdGenerationofMiceThatWere Kn0cked—OutOf7_erc ZHANGJunling,HUANGSong,LULu,LIDeguan,WUHongying,MENGAimin InstituteofRadiationMedicine,ChineseAcademyofMedicalSciences,theKeyLaboratoryofRadiationMedicineand MolecularNuclearMedicine,Tianjin300192,China MENGAimin,E—mail:aimin meng@126.com _ _ A【bstract】 0bjective Toobservethedifferenceinnumberofepidermalstemcellanditsfunctionbetweenwild— type(WT)miceandthethirdgenerationofTercknockout(G3Terc)mice.Methods Flowcytometrywasusedtoanalyse andsortepidemralstemcells;Quantitativereal—。timePCRisusedtoanalysetherelativeexpressionlevelofp21inepider- malstem cells;Self-renewalabilitywasreflectedbythenumberofcoloniesfomr edbyepidemr alstem cells.Results Basal andsuprabasalratiosinepidermalstemcellsinWTmicew

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