邻位连接技术_一种新的高灵敏度蛋白质检测技术邻位连接技术_一种新的高灵敏度蛋白质检测技术.pdf

ISSN 2008 4 CN 113870Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biolo y 24(4) : 383~ 389 技术与方法 : 1) 1) , 2) * 李丹滢 , 周国华 (1) 中国药科大学生命科学与技术学院, 南京 210009; 2) 华东医学生物技术研究所, 南京 210002) 蛋白质组学( proteomics) 诞生以来, 高效准 的蛋白质检测技术受到越来越多的关注. 最近, 一种高灵敏度的蛋白质检测技术, 邻位连接技术( proximity li ation assay, PLA) 被建立. 该技术采用 核酸适体( aptamer) 或单多克隆抗体核酸复合物作为邻位连接探针( proximity probes) . 当 一对邻位 探针同时识别同一个目标蛋白分子时, 它们将在空间位置上相互临近, 通过连接反应形成 一段可扩 增的DNA 标签序列, 该标签序列能够反映待测蛋白的种类及浓度. 该技术将对蛋白质的检测转变 为对DNA 核酸序列的检测, 实现了特殊蛋白质的检测, 定量及定位. 文章从该方法的产生背景, 发 展过程, 原理以及探针制备等方面对该方法进行了系统的介绍, 列举了该方法的几种重要应用, 并 对该方法在蛋白质组学研究领域的应用前景进行了展望. 邻位连接技术; 蛋白质组学; 蛋白质检测 Q51 Proximity Ligation Assay :A New and Highly Sensitive Protein Detection Method 1) 1) , 2) * LI DanYin , ZHOU GuoHua (1) College of Lfi e Science and Technology, China Pharmaceutical University, Nanj ing 210009, China; 2) Huadong Research Institutef or Medicine and Biotechnics, Nanj ing 210002, China) Abstract Efficient and precise techniques for protein detection are crucial in proteomics studies. Recently, proximity li ation assay ( PLA ) , a new protein detection technique in proteomics, was developed, and attractin more and more researchers in the field. The proximity probes, aptamers or complexes of mono polyclonal antibody with oli onucleotide, are desi ned to bind pairwise to tar et proteins and be able to ive rise to an amplifiable DNA sequence ta by li ation when brou ht in proximity, which reflect the identities and amounts of the tar et proteins. This approach employs the analy