原核表达手册 pET System Manual.pdf

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2017-12-24 发布于浙江
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原核表达手册 pET System Manual

pET System Manual 第 10版pET系统操作手册于2002年7月修订完成。Novagen一直致力于研制开发pET系统，并将 pET系统的新进展编入本手册。欲获取 pET系统的任何必威体育精装版资讯，请随时登录Novagen网站。内容提要内容提要 1 I. 系统介绍 4 A. 概况 4 B. 使用许可及协议 4 C. 系统组成 4 D. 选择合适的pET 载体 4 基本考虑因素 5 蛋白溶解性及细胞定位 5 融合标签 5 各种pET 载体特性列表 7 E. pET 载体克隆策略 8 制备不带融合标签的天然蛋白 8 制备以蛋白酶切去融合标签的天然蛋白 9 不需连接反应的克隆方法(LIC) 9 F. pET 系统蛋白表达的调控 10 T7lac 启动子 10 pLysS 和pLysE 宿主菌 10 载体与宿主菌共同影响表达水平 10 含葡萄糖的培养基 11 pLacI 宿主菌 11 pETcoco™ 系统 11 G. 用于克隆的宿主菌 11 H. 用于表达的宿主菌 12 蛋白酶缺陷型 12 调节培养体系中所有细胞的表达水平 12 二硫键的形成及增加蛋白可溶性 12 补充稀有密码子