天芪醒脑颗粒对拟血管性痴呆大鼠学习记忆影响及其机制的实验研究.docVIP

精品论文 参考文献 天芪醒脑颗粒对拟血管性痴呆大鼠学习记忆影响及其机制的实验研究 哈尔滨市第四医院老年病科 黑龙江哈尔滨 150001 　　【摘 要】目的：观察天芪醒脑颗粒对VD大鼠脑内谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和乙酰胆碱酯酶（AchE）活性以及学习记忆行为的影响，探讨其治疗VD机制。方法：选用纯系 wistar 老年大鼠81只随机分为：假手术组、模型组、中药组和西药组，利用2-血管阻断法（2- VO）制作VD大鼠模型。中药组给予天芪醒脑颗粒混悬液治疗。对VD大鼠治疗前后脑组织内GSH - PX和AchE活性的改变以及穿梭箱实验成绩测试结果进行对比分析。结果：统计分析表明，天芪醒脑颗粒可明显降低VD大鼠脑组织中AchE活性，有效增强脑组织中GSH-PX的活性，同时穿梭箱实验过程中VD大鼠的电击次数和电击时间明显减少。结论：天芪醒脑颗粒能提高VD大鼠的记忆学习能力，其对脑内AchE活性的降低、GSH-PX 活性的提高是治疗VD大鼠机制。 　　【关键词】血管性痴呆；天芪醒脑颗粒；谷胱甘肽过氧化物酶；乙酰胆碱酯酶 　　 　　 　　血管性痴呆（VascularDementia，VD）是一种严重认知功能障碍综合征，主要是由出血性卒中或者缺血性卒中导致行为、认知出现障碍所致[1]。随着老龄化进程加剧，VD已成为老年人群中常见病和多发病。虽然目前没有绝对有效的手段治愈VD病症，但现有的研究却也表明，VD 是迄今为止唯一可防治的痴呆性疾病，早期干预病情可能具有可逆性[2]。近年来，中医对VD病因病机的认识不断深入[3，4]，运用中医药治疗VD的研究也常见报道[5，6]，且效果良好，结果表明中医药在VD的防治与治疗过程具有一定的优势，但目前的研究多针对临床应用，而对药物的作用机制研究较少。本文采用改进的拟 VD 造模方法制作VD大鼠模型，通过动物实验对VD进行基础研究，同时，对中药天芪醒脑颗粒治疗VD的药理作用机制进行了分析和探讨。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验材料 　　1.1.1 动物 选用纯系健康 wistar 雄性老年大鼠81只，18～20 个月龄，体重控制在500plusmn;20 g的，常温喂养，由黑龙江省肿瘤医院实验动物中心提供。 　　1.1.2 药品 天芪醒脑颗粒（天南星、远志、白附子、制半夏、地龙、当归、人参、黄芪、制首乌、川芎、麦冬、白术、石菖蒲、升麻以及川牛膝）由黑龙江省中医研究院制剂室提供；脑复康，天津今世制药有限公司，批号：0000409。 　　1.1.3 LD5-2型电动离心机，北京；FZQ-2型分析振荡器，江苏；DY89-1型电动玻璃匀浆机，宁波；仪器RF-540型电热恒温水浴箱，江苏；DCS-2型大鼠程控穿梭箱，中国医学科学院药物研究所；TN-100B型托盘式扭力天平，上海；722光栅分光光度计，上海第二分析仪器厂。 　　1.1.4 试剂 谷胱甘肽过氧化物酶（GSH - PX）测定试剂盒，乙酰胆碱酯酶（AchE）测定试剂盒，考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒，均由南京建成生物工程研究所提供；beta;-淀粉样蛋白标准品由美国Sigma公司提供。 　　1.2 方法 　　1.2.1 VD 模型的建立及用药 造模方法采用2- VO法。随机将81只大鼠分为假手术组（22）、模型组（19）、中药组（20）及西药对照组（20）。术前禁食水12 h，麻醉采用腹腔注射10 %的乌拉坦（1 g/ kg），消毒；颈部正中切口，钝性分离双侧颈总动脉及神经，随即使用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉，夹闭10分钟后，开通10 分钟，再夹闭 10分钟，再次开通后进行伤口缝合；术后保温饲养，每只大鼠需连续5d肌肉注射青霉素20万U，防止感染。假手术组的大鼠仅进行分离双侧颈总动脉。术后7d，中药组每日灌服予天芪醒脑颗粒蒸馏水混悬液，2丸/只（大鼠=成人times;0.018），每日2次。西药组给予灌服脑复康水溶液（浓度为40 mg/ mL），药物剂量 6 mL/ kg，每日1次，治疗时间均为30d。模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃。 　　1.2.2行为学测试方法 采用穿梭箱试验法术前及术后分别进行行为学检测。将大鼠放入穿梭箱内，适应 3 min 后打开电源，蜂鸣后穿梭箱底部一侧通电，大鼠被电击至另一侧（被动逃避）。如此反复，大鼠听到鸣笛后即从电流区域逃到无电区域（主动逃避），记录电击次数和电击时间。 　　1.2.3 生化指标检测（GSH-PX、AchE） VD大鼠脑组织匀浆按试剂盒说明操作。 　　1.2.4 统计学处理 采用SPSS13.0软件进行统计学处理。数据用 表示，用t检验等方差分析处理。 　　2 结果 　　2.1天芪醒脑颗粒对痴呆大鼠行为学影响 　　表1给出了四组大鼠在穿梭箱实验中的各项指标，结果表明：四组术前（治疗前）电