强心复脉颗粒对兔缺血再灌注窦房结细胞凋亡及bax-中国中药杂志.pdfVIP

强心复脉颗粒对兔缺血再灌注窦房结细胞凋亡 及 Ｂａｘ，Ｂｃｌ２，ＦａｓＬ蛋白表达的影响 １ １ １ １ ２ １ 刘如秀 ，谭　双 ，吴振宇 ，张　云 ，黄　希 ，刘志明 （１中国中医科学院广安门医院，北京 １０００５３；２解放军总医院，北京 １００８５３） ［摘要］　目的：探讨临床有效中药复方强心复脉颗粒防治病窦综合征的分子作用机制。方法：采用兔右冠状 动脉根部结扎／放松法制备兔窦房结缺血再灌注模型，运用原位末端标记（ＴＵＮＥＬ）法观察强心复脉颗粒对兔右冠 状动脉缺血再灌注致窦房结细胞凋亡的影响，并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Ｂａｘ，Ｂｃｌ２，ＦａｓＬ 蛋白表达的影响，用ＩｍａｇｅｐｒｏＰｌｕｓ图象分析系统计算Ｂａｘ，Ｂｃｌ２，ＦａｓＬ表达平均吸光度值。结果：兔右冠状动脉缺 血再灌注所致窦房结损伤可明显诱导兔窦房结细胞发生凋亡，引发ＦａｓＬ基因蛋白表达增强，同时显著引发Ｂａｘ基 因蛋白表达增强，Ｂｃｌ２／Ｂａｘ下降；强心复脉颗粒可显著下调ＦａｓＬ和Ｂａｘ基因的蛋白表达，上调Ｂｃｌ２／Ｂａｘ，明显抑 制和阻断窦房结细胞发生凋亡。结论：通过调节缺血再灌注后窦房结 Ｂａｘ，Ｂｃｌ，ＦａｓＬ基因的蛋白表达从而抑制和 ［收稿日期］　２００７０６１６ ［基金项目］　国家中医药管理局项目（０４０５ＪＰ６１）  ［通讯作者］　 刘志明，Ｔｅｌ：（０１０Ｅｍａｉｌ：ｌｉｕｒｕｘｉｕｌ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ ·７６· 第３３卷第１期 　　　 中国 中药杂 志 Ｖｏｌ．３３，Ｉｓｓｕｅ　１ ２００８年１月 　　　　　　　　　ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ　　　　　　　 Ｊａｎｕａｒｙ，２００８ 阻断细胞凋亡的发生，可能是中药复方强心复脉颗粒防治病窦综合征窦房结缺血再灌注损伤的分子作用机制。 ［关键词］　窦房结；缺血再灌注；细胞凋亡；强心复脉颗粒 ［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１００１５３０２（２００８）０１００７６０６ 　　大量的动物实验研究及尸检死亡病例窦房结标 以造成窦房结动脉急性闭塞或再灌注。以钳夹后出 本的研究揭示细胞凋亡在窦房结损伤的病理演变过 现明显窦缓［ＡＡ（两心房）间期延长４０ｍｓ以上］和／ ［１３］ 或出现结性逸搏心律作为造模成功的标准。缺血 程中占用重要的地位 。已有研究证实，包括心肌 缺血、再灌注损伤及病态窦房结综合征在内的多种 ６０ｍｉｎ后松钳再灌注６０ｍｉｎ。造模结束后立即进行 心血管系统疾患过程中都有凋亡因素的参与，细胞 标本制备。 凋亡是这些疾患发生发展的一个重要的病理生理基 １．６　动物分组、给药 ［４］ ４０只家兔随机分成以下５组，每组８只。 正 础 。因此，干预窦房结细胞凋亡在病窦综合征的 ① －１ 防治研究中具有重要的临床和病理学意义。传统中 常对照组（假手术组），生理盐水５ｍＬ·ｋｇ ； 模 ② －１ 医药对窦房结缺血再灌注诱导的细胞凋亡的干预影 型对照组（缺血再灌注组），生理盐水５ｍＬ·ｋｇ ；