几种不同检验方法用于阴道细菌检验临床对比分析.docVIP

精品论文 参考文献 几种不同检验方法用于阴道细菌检验临床对比分析 （山东省威海市立医院南院区，威海264200） 　　【摘要】目的：对比几种检验方法用于阴道细菌检验检测效用，评价不同方法临床应用价值。方法：前瞻性研究，以2015年1月～2016年7月，医院收治并进行阴道分泌物检查的对象174例，以无菌面试子采集3份阴道壁样品，一份进行细菌培养，一份进行革兰染色，一份进行PCR检查。结果：细菌培养、革兰染色、PCR检验阳性率分别为58.0%、78.2%、75.9%；革兰染色法阳性率低于细菌培养法、PCR法，差异有统计学意义（P＜0.05），PCR检查法细菌培养法阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）；格兰染色法与细菌培养法一致性系数K=0.632、与PCR检验法k=0.573，细菌培养法与PCR检验法k=0.847,属于高度一致。结论：革兰染色法敏感有待提高，建议采用PCR法，速度快、效率高，一定程度上可提到细菌培养法，可信度高，可作为阴道细菌检验首选方法。 　　【关键词】阴道细菌；临床检验；鉴定 　　阴道感染是一种常见病，与阴道炎、流产、不良妊娠结局等关系密切，开展阴道细菌检验，是进行相关疾病诊断、治疗的基础。细菌检验的方法较多，主要包括格兰染色法、细菌培养法以及PCR法，不同方敏感性、效用不尽相同。本次研究实对比几种检验方法检测效用，评价不同方法临床应用价值。 　　1资料及方法 　　1.1一般资料 　　前瞻性研究，以2015年1月～2016年7月，医院收治并进行阴道分泌物检查的对象174例，年龄24～55岁。平均（34.4plusmn;10.2）岁。纳入标准：①有进行阴道细菌检验需要，如妊娠、阴道炎患者；②知情同意；③未合并支原体、衣原体感染；④有一项或多项细菌检验指征，包括出现细膜分泌物、阴道后穹窿分泌物pHge;4.5、氨臭味实验阳性等。排除标准：①质控不到位；②已进行抗生素治疗；②月经期；③2d内性生活。 　　1.2方法 　　进行详细的妇科检查，以无菌面试子采集3份阴道壁样品，送检。必要时进行PH值检查。一份进行细菌培养，一份进行革兰染色，一份进行PCR检查。（1）革兰染色：选择光滑、无污染、无油渍、厚度1.5cm以下载玻片，将分泌物均匀涂抹于玻片，用力均匀，固定自然晾干，在火焰上通过3次成型。，精心初染色，95%酒精脱色，摇动10-30s，至无紫色脱落，静置1～1.5min，水冲洗，进行复染，水冲洗，自然干燥，镜检。（2）细菌培养：37℃常温下胚芽48h，选择半透膜、灰色、光滑水滴形状的菌落，采用细菌鉴定仪检测。（3）PCR：置于生理盐水，离心100min，转速12000r/min,去上清液，加入碱性裂解液，98%环境中加热，十分钟后理性，转速12000r/min,离心速度5min，取上层液，制作阴道分泌物DNA模板，将没有添加脱氧核糖核酸视为阴性组，PCR扩增实验，进行检查扩增时，还需提取25mu;l无菌去离子水，30mu;l石蜡覆盖表面，进行聚合酶链反应循环，32环，1min85℃以下，1min 72℃以下，1min94℃以下，32次循环后，72℃下最后一个循环延伸，时间5min[1]。 　　1.3统计学处理 　　使用Excel表记录数据，SPSS20.0统计学软件进行计算，采用（plusmn;s）反映计量资料，两组间比较前，采用Kolmogorov-Sminmov法检验是否符合正态分布，采用n或%反映计数资料，两组间比较采用检验或Fisher精确性检验，一致性检验采用Kappa检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。 　　2结果 　　革兰染色法阳性率低于细菌培养法、PCR法，差异有统计学意义（P＜0.05），PCR检查法细菌培养法阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。格兰染色法与细菌培养法一致性系数K=0.632、与PCR检验法k=0.573，细菌培养法与PCR检验法k=0.847,属于高度一致。 　　表1 三种细菌检测法结果对比[n（%）] 　　 　　3讨论 　　本次研究显示革兰染色法、细菌培养法、PCR法检验阳性率存在显著差异，革兰染色法敏感性相对较低，与细菌培养法一致性系数K=0.632，而细菌培养法、PCR检测法k=0.847,属于高度一致，提示PCR可提到细菌培养法，一致性强。当然，格兰染色法也有其应价值，操作简单、廉价，其对真菌性阴道炎效用更高，可明确判断病原体类型，考虑到真菌感染是阴道病特别是难治性阴道病的主要病原体，革兰染色法仍有较大的价值，其对细菌感染不敏感。相较于细菌培养法、PCR法，革兰染色法采用积分判断是否为阳性，参差划分更科学，通过对纤毛菌、滴虫分层染色，经处理病原体失活，利于观察，仍有较高的应用价值。细菌培养法是进行细菌检验的金标准，本次研究显示其阳性率达到78.2%