灵芝菌丝体液体深层发酵技术的研究.doc

中国粮油学会第三届学术年会论文选编 灵芝菌丝体液体深层发酵技术的研究 程树峰祖丽亚伍松陵唐芳 国家粮食局科学研究院 我国是一个产粮大国，小麦的产量仅次于稻谷，年产量约为8500万吨。麸皮是面粉加工的副产 品，约占小麦重量的30％，我国麸皮年产量约为2550万吨。麸皮含有丰富的淀粉、蛋白质、粗纤维、矿 物质及维生素，是微生物发酵的优质原料，研究开发一些以此为原料的高附加值生物产品，对于小麦 的综合利用具有重大意义。 灵芝(Ganoderma lucidum)是我国名贵的要用真菌，在我国已有上千年的药用历史了。据古籍记 载灵芝具有益心气、益肺气、坚筋骨、利关节、安神补肝等功能【1—21。现代医学表明：灵芝(包括灵芝菌 丝体)中富含灵芝多糖、甾醇类、生物碱等多种生物活性物质【3】。灵芝多糖对肿瘤细胞的生长有明显 的抑制作用【4】。采用灵芝菌丝体深层发酵方面生产灵芝菌丝体，其具有生产成本低、生产周期短、有 利于工业化的优点。这一方法适合于保健品和药品的生产，是食用菌研究的一个发展方向。本项研究 是在前人的研究基础上，对发酵所用谷物类培养基原料进行预处理，提高灵芝菌丝体产品的纯度和 质量，并经过对灵芝菌丝在发酵过程中诸多影响因素进行详细的研究，现已获得了较为满意的结果。 1材料与方法 1．1实验材料 1．1．1灵芝菌种：为本实验室保存菌种。 1．1．2母种斜面：土豆培养基 1．1．3原料：土豆，麸皮粉，玉米粉，大米粉，酵母粉，蛋白胨，白糖及无机盐。 1_2培养方法一级摇瓶培养，在500ml三角瓶种，；bn．k100ml培养基，接种量约O．5cm2／瓶，在25。C， 培养6—7天。二级摇瓶培养，摇床转速为200r／min，培养4天。除有特别说明外，每种条件试验三次 重复，结果取平均值。 1．3原料预处理方法在培养基配制前，一些谷物类原料均要预先进行高温酶解。方法是：将原料于 液化锅种，加入适量的水，加热至95。C，加入高温淀粉酶，保温20min，过滤。用滤液配制试验用的培养 基。在本试验中所有以谷物为原料的培养基，原料均进行了高温酶解处理。 1-4测试方法菌丝干重：取100ml培养液，在4000r／rain离心10rain，在80℃烘箱中干燥至恒重，由 电子天平称量干重。 1．5主耍试验设备和仪器16升发酵罐、50升发酵罐、摇床、酸度计、分析天平、干燥箱 作者简介：程树峰，男，48岁，副研究员，北京西城区百万庄大街11号 一525—  粮食与食品专业 2结果与讨论 2．1培养基组份对灵芝菌丝得率的影响 2．1．1碳源试验：在基础培养基(0．5％豆饼粉，0．1％碳酸二氢钾，0．05％硫酸镁)中加入表1中各种碳 源，其中玉米粉3％、白糖3％、大米粉3％和麸皮+10％(麸皮酶解提取物约4％)，进行碳源试验。结果 如图l。 3 2·5 善 2 删1．5 蓊 - 0．5 O 玉米粉 白糖 大米粉 麸皮· 碳源种类 图l不同碳源对灵芝菌丝生长的影响 从图1可以看出，麸皮作为碳源效果最好，玉米分和大米粉相同，白糖次之，因此本试验选用麸 皮作为原料。 2．1．2氮源试验：在基础培养基(10％麸皮，O．5％8糖，O．1％磷酸二氢钾，0．05％硫酸镁)中分别加入各 种氮源，酵母粉、蛋白胨、尿素、硫酸铵和豆饼粉均加0．5％，进行氮源试验。结果如图2。 3 2·5 2 §1．5 冀 1 删O·5 O 酵母粉 蛋白胨 尿素 硫酸铵 豆饼粉 氮源种类 圈2不同氮源对灵芝菌丝生长的影响 从图2可以看出，灵芝菌丝以豆饼粉和酵母粉作为氮源均能良好的生长，蛋白胨和硫酸铵次之， 而加入0．5％尿素，灵芝生长受到抑制。根据试验结果，本试验选用豆饼作为氮源。 2．2几种摇瓶培养条件试验 2．2．1培养基初始pH对灵芝菌丝生长的影响：将配制好的培养基，分别装在500ml三角瓶中，每瓶 100ml。然后，用稀酸或稀碱分别调节pH值至4、5、6,6．5、7，接种，进行摇瓶培养。结果如图3。  中国粮油学会第三届学术年会论文选编 3 2．6 § 2 咖1．5 蟀 ， 删 1 0．5 0 4 5 6 6．5 pH值 圈3不同pH值对灵芝菌丝生长的影响 从图3可看出，灵芝菌丝在OILS-7均能良好的生长，其最适pH为6．0 2．2．2不同通气量对灵芝丝生长的影响：采用基础培养基，10％麸皮，O．5％豆饼粉、O．5％白糖，0．1％磷 酸二氢钾，0．05％硫酸镁，在500ml三角瓶中分别加入60ml，80ml，100rid，120ml培养基，进行摇瓶培 养。结果如图4。 2．7 2．6 —2．6 曼9 R 删‘‘。 蓦2．5 2．4 ■ 2．4 60 80 100 120 装液量 围4不同通气量对灵芝蕾丝生长的影响 从图4可看出，灵芝菌丝在发酵过