白色念珠菌检查法.ppt

白色念珠菌检查法 *PowerPoint 2002 and up required to use the template. 操作过程 取供试液10ml（相当于供试品1g、1ml、10cm2）直接或处理后接种至适量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖肉汤培养基中，培养48～72 小时。 取上述培养物划线接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上，培养24～48 小时（必要时延长至72 小时）。 白色念珠菌在沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的菌落呈乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 若平板上无菌落生长或生长的菌落与上述菌落形态特征不符，判供试品未检出白色念珠菌。 如平板上生长的菌落与上述菌落形态特征相符或疑似，应挑选2～3个菌落分别接种至念珠菌显色培养基平板上，培养24～48 小时（必要时延长至72 小时）。 若平板上无绿色或翠绿色的菌落生长，判供试品未检出白色念珠菌。 若平板上生长的菌落为绿色或翠绿色，挑取相符或疑似的菌落接种于1%吐温80-玉米琼脂培养基上，培养24～48 小时。取培养物进行染色，镜检及芽管试验。 芽管试验 用铂金耳挑取少量的1%吐温80-玉米琼脂培养基（或沙氏葡萄糖培养基和血平板上）的培养物，接种于加有一滴血清的载玻片上，盖上盖玻片，置湿润的平皿内，置35～37℃、1～3 小时，置显微镜下观察，可见到由孢子长出短小芽管。 若上述疑似菌为非革兰阳性菌，显微镜未见厚膜孢子、假菌丝、芽管，判供试品未检出白色念珠菌。 白色念珠菌的典型特征 1.白色念珠菌菌细胞呈圆形或卵圆形,直径为3-6μm， G+，但菌体着色不均匀，以出芽方式繁殖，在 适宜的培养基上芽生孢子及假菌丝生长，在假菌 丝其末端形成厚膜孢子。 2.白色念珠菌具有β-硝基半乳糖苷酶，可分解NGL， 使对-硝基苯酚游离，在碱性条件下显色。 白色念珠菌的菌落特征 常见念珠菌在显色培养基上的菌落颜色不同 白色念珠菌 显绿色、翠绿色（直径约2nm) 热带念珠菌 显蓝色、铁蓝色（直径约1.5nm) 克柔念珠菌 显粉红色（直径约4.5nm) 光滑念珠菌 显紫色（直径约2nm) 其它念珠菌 显白色（直径不定) 常见念球菌及酵母菌生化试验结果 白色念珠菌与酵母菌的鉴别 酵母菌在显色培养基上不显色，为乳白色 酵母菌无假菌丝和厚膜孢子 酵母菌可发酵蔗糖但不能发酵麦芽糖 以上试验结果和特征可与念珠菌进行鉴别 鉴定依据 菌落特征 显色培养基反应 厚膜孢子形成 假菌丝末端或侧缘形成典型的厚膜孢子 芽管形成 由孢子长出短小芽管 生化试验 注意与其他常见念珠菌和酵母菌的鉴别 结果判断 试验结果符合以上条件应判该供试品检出白色念珠菌。 * 乳白色或淡红色，表面光滑 TTC平板（氯化三苯四氮唑-沙保罗琼脂培养基） 灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 血平板 灰色或奶油色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 1%吐温80-玉米琼脂培养基 呈乳白色偶见淡黄色，表面光滑有浓酵母气味，培养时间稍久则菌落增大，颜色变深、质地变硬或有皱摺。 沙氏葡萄糖琼脂培养基 菌落形态 培养基 － + + － 白色念球（1） 尿素酶分解 麦芽糖发酵 葡萄糖发酵 蔗糖发酵 － + + + 热带念球 － + + － 白色念球（2） + + + + － － － 酿酒酵母菌 － 啤酒酵母菌 生化试验 菌名称 *