中检所抗生素合作项目.ppt

抗生素分析2005版药典方法及改进 注射用阿莫西林克拉维酸钾 --symmetry 背景: 药典2005版难重现的方法 要求:1主成分峰与相邻杂质的分离,2阿莫西林闭环二聚体的分离 条件: Symmetry Shield RP18 4.6X250mm流动相A 为pH 6.0的0.01mol/L磷酸二氢钾溶液，流动相B为pH 6.0的0.01mol/L磷酸二氢钾溶液- 乙腈(20:80)，流速为每分钟1.0ml，线性梯度洗脱；检测波长为254nm。 注射用阿莫西林钠 -- Symmetry Shield RP18 注射用阿莫西林钠 -- Xbridge Shield RP18 吉他霉素的分析 吉他霉素又称柱晶白霉素（Leucomycin），含有多个组分，其基本结构由16元环大环内酯（macrolide）、碳霉素（carbomycin）和碳霉氨糖（L-arcanose）造成，各组分间的差别仅为16元环大环内酯环上3位的酰基和碳霉氨糖部分4位的酰基（R2）不同。酰基基团越大，极性越小；反之，则极性越大，-COCH3的极性大于-COCH2CH(CH3)2。 吉他霉素--Symmetry C18 NH4OAc:MeOH:ACN=30:65:5柱温60℃ 检测波长为231nm 流速:1ml/min 实验结果 麦白霉素 麦白霉素（Meleumycin）为麦迪霉素A1（Mydecamycin A1）及吉他霉素A6（Kitasamycin A6）（柱晶白霉素（Leucomycin））两个组分为主的混合物，含麦迪霉素A1不得低于35.0％ 麦迪霉素A1 R1=COCH2CH3 R2=H R3=COCH2CH3 吉他霉素A6： R1=H R2=COCH2CH3 R3=H 挑战:化合物偏碱性---色谱柱寿命和方法的稳定性 麦白霉素-- XBridge C18 XBridge C18 150 × 4.6 mm，5μm 红霉素分析比较 红霉素--XBridge Shield RP18 头孢克洛胶囊-药典规定方法 头孢克洛胶囊-XbridgeC18 头孢克洛胶囊-UPLC方法 注射用氨苄西林钠HPLC方法 注射用氨苄西林钠UPLC方法 要求：阿莫西林峰和相邻杂质峰的分离度应大于1.5 流动相A为0.05mol/L磷酸盐缓冲液 （取0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至5.0）-乙腈（99：1）； 流动相B为0.05mol/L磷酸盐缓冲液（pH 5.0）-乙腈（80：20） 检测波长为254nm， 流速为每分钟1.0mlSymmetry Shield RP18 4.6*150mm 5um 时间（分钟） 流动相A（％） 流动相B（％） 0 92 8 25 0 100 40 0 100 41 92 8 55 92 8 RS=13.8 流动相A为0.05mol/L磷酸盐缓冲液 （取0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，用2mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至5.0）-乙腈（99：1）； 流动相B为0.05mol/L磷酸盐缓冲液（pH 5.0）-乙腈（80：20）； 检测波长为254nm， 流速为每分钟1.0ml Xbridge Shield RP18 4.6*150mm 5um 时间（分钟） 流动相A（％） 流动相B（％） 0 92 8 25 0 100 40 0 100 41 92 8 55 92 8 Rs=26, USP=1.26 吉他霉素组分-XBridge Shield RP18 Rs(A5,A6)=3.15 以0.1mol/L醋酸铵溶液-甲醇-乙腈（40:55:5）为流动相； 柱温60℃； 检测波长为231nm 流速:1ml/min XBridge Shield RP18