胚胎干细胞在成体骨髓中长期存活的观察研讨.pdf

胚胎 目录 胚胎干细胞在成体骨髓中长期存活的观察研究………………………………………．1 中文摘要…………………………………………………………………………………．．1 英文摘要…………………………………………………………………………………。3 前言……………………………………………………………………………………………………………………5 第一部分小鼠胚胎干细胞的建系及鉴定……………………………………………。8 试剂与材料……………………………………………………………………………8 实验方法………………………………………………………………………………11 第一部分结果……………………………………………………………………19 第一部分讨论……………………………………………………………………23 第二部分骨髓腔内移植模型的建立和观察………………………………………。25 试剂与材料…………………………………………………………………………一25 实验方法……………………………………………………………………………26 第二部分结果……………………………………………………………k……。30 第二部分讨论……………………………………………………………………．35 第三部分移植后骨髓来源的Oct4+细胞系的建立及检测…………………………38 试剂与材料…………………………………………………………………………38 实验方法……………………………………………………………………………．．40 第三部分结果……………………………………………………………………44 第三部分讨论……………………………………………………………………53 第四部分胚胎干细胞的在成体骨髓内的分化……………………………………。56 试剂与材料…………………………………………………………………………．56 实验方法……………………………………………………………………………57 第四部分结果……………………………………………………………………63 第四部分讨论……………………………………………………………………．．68 参考文献…………………………………………………………………………………．7l 全文总结…………………………………………………………………………………．．76 综j苤…………………………………………………………………………………………………………………．77 成体骨髓中多能干细胞的种类及其应用…………………………………………77 ljf寸页…………………………………………………………………………………………………………………．90 博士期间发表文章…………………………………………………………………．90 申请专利……………………………………………………………………………。90 博士学位论文的资助项目……………．．：…………………………………………．．90 会议摘要……………………………………………………………………………90 英文缩略词…………………………………………………………………………9l 致谢………………………………………………………………………………………小……………．．93 北京协和医学院中国医学科学院博士研究生学位论文 胚胎干细胞在成体骨髓中长期存活的观察研究 中文摘要 目的 CelIs，ESCs)成为当今生命科学和生物技术研究的 胚胎干细胞(embD，onic妣m 热点，这是因为它具有自我更新和多能分化的能力。多年来，“成体组织中是否存在胚 胎干细胞’’一直是一个很有争议的问题，很多实验室已报道可以从骨髓中分离出来 无限分裂繁殖，而且可以分化成几乎所有类型的细胞。但是对于这些原始细胞的来源 和存在机制，人们并不清楚。因此，骨髓中是否存在ESCs就变成了一个很有争议的问 题。 之前的研究都是通过不同的方法从骨髓中分离、提取并培养这些ESCs样的干细 胞，而我们首次通过相反的方式直接将小鼠ESCs注入到小鼠的骨髓腔里，通过观察 ESCs在体内的分布生长情况，从而思考体内是否有这样一个适宜ESCs生存的环境。 方法为了更好地追踪ESCs在体