275-第十四章 基因工程技术原理与应用.doc

第十四章 基因工程技术原理与应用 [试题荟萃] 一、填空题 1．BarnH Ⅰ是识别6个核苷酸的酶，其切割产物的平均长度的理论值是______。 2．通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的大小不同的片段，可以构建显示该区域各限制酶切位点位置的______。 3．EcoK是Ⅰ类限制性内切酶，分子组成是α2β2γ。α亚基的作用是______；β亚基的作用是______；γ亚基的作用是______。 4．个体之间DNA限制性片段长度的差异称为______。 5．限制性内切核酸酶的命名原则是：第一个字母来自______；第二、三两个字母来自______；第四个字母则表示______。 6．在限制性内切核酸酶切反应管中添加各种成分后，需要离心数秒钟，其目的是______和______。 7．为了进行部分酶切可以采用下列措施：______、______和______等。 8．限制性内切核酸酶的识别序列分别由4、6、8对碱基组成，它们在DNA序列上的切割频率的理论值分别是______、______和______。 9．限制性内切核酸酶通常保存在______浓度的甘油溶液中。 10．测序酶是修饰了的T7 DNA聚合酶，它只有______酶的活性，而没有______活性。 11．切口平移(nick translation)法标记DNA的基本原理在于______的______和______的作用。 12．欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变为平末端的双链形式，通常采用的方法是______和______。 13．反转录酶具有催化DNA合成的作用，同时还具有______的作用，可以将DNA-RNA杂合双链中的______消化掉。 14．基因工程中所用的载体主要有三类：______、______和______。 15．一个最简单的质粒载体必须包括以下几个部分：______、______和______。 16．如果两个质粒不能稳定共存于同一个寄主细胞中，则属于______群，这是因为他们的______所致。 17．质粒的拷贝数是指细胞中______。 18．ColEl质粒复制的起始需要三种酶：______、______和______。 19．那些没有可以检测表型的质粒称为______。 20．噬菌体可以被改造作为基因工程载体，主要是由于______和______。 21．λ噬菌体载体主要有两种类型，插入型和置换型。就酶切位点来说，插入型为______个；置换型为______个。 22．M13噬菌体DNA的复制分为三个阶段：______、______和______。 23．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的．其中来自质粒的结构主要是______和______；来自噬菌体的主要结构是______。 24．λ噬菌体由于包装的限制，插入外源DNA片段后，总长度应在噬菌体基因组的______范围内。 25．引物在基因工程中至少有4方面的用途：______、______、和______。 26．利用Taq DNA聚合酶进行PCR反应所得产物不是平末端，而是在______端带有一个突出的______；据此人们设计了PCR产物的______克隆法。 27．简并引物PCR主要是依据蛋白质的氨基酸序列设计______引物来扩增相应的基因。 28．现有的克隆基因的策略大体上可以分为三类：______、______和______。 29．DNA重组连接的方法大致有4种：______、______、______和______。 30．SD序列是mRNA分子中与______结合的序列，位于______密码子的上游；在基因组中的对应位置是______位点与______位点之间。 31．携带有外源基因并能持久传递给子代的植物称为______植物；这些外源基因就叫做______。 32．重组子的筛选有两层含义，一是______；二是______。 33．限制性内切核酸酶切割DNA后产生5端突出的黏性末端，可以用______进行3端标记；如果限制性内切核酸酶切割DNA后产生3端突出的黏性末端，可以用______进行5端标记。 34．为了获得单链标记的DNA探针可以采用以下三种方法：______、______和______。 35．根据Northern杂交的结果可以说明______；根据Southern杂交的结果可以说明______；根据western杂交的结果可以说明______；根据原位杂交的结果可以说明______。 36．Northern杂交和Southern杂交的根本区别在于______和______。 37．欲将某一具有单链突出末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式，通常采用的方法有______和______。 38．由于不同构型的DNA