临床细菌检验标本的采集、运送PPT.ppt

临床细菌检验标本的处理;临床细菌检验标本的采集、运送、保存和处理;4、避免来自寄生菌的污染，应当保证每份标本代表感染过程。如来自皮肤、呼吸道的正常菌丛过早、过度生长，会干扰培养结果。分离时应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。 5、分离细菌的目的：查找与疾病相关的微生物及其对抗生素的敏感性，帮助临床诊断、治疗、预后和流行病学的调查。 6、如疑似对低温敏感的淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌感染标本应立即处理。脑脊液、生殖道、眼睛、内耳标本决不可冷藏。 7、根据标本来源选用培养基及孵育环境。 ;血液、骨髓标本的处理;然后涂片革兰染色镜检，把镜检结果及时电话通知主管医师，并填写初检结果临床通知单。例如：检到葡萄状排列G+C,可报告“找到G+C，形似葡萄球菌”。 常规培养5天，认为阴性者，报告无菌生长 正常人的血液、骨髓是无菌的，标本中检出细菌，都应视作病原菌 ﹝需排除污染﹞。 ;涂片查细菌、真菌：尿液以3000r/min离心30min，取沉淀物涂片革兰染色镜检。涂片查抗酸杆菌：尿液以4000r/min离心30min，取沉淀物涂片抗酸染色镜检。 注意：10%的尿路感染患者，可能会在同份尿标本中分离到2种细菌，并都是病原菌。若同份标本中检到3种以上不同种微生物，应认为收集或处理标本不当被污染，一般认为：尿标本中革兰阴性杆菌菌落计数105 CFU/ml、革兰阳性球菌计数104CFU/ml有诊断意义，报告鉴定结果及药敏试验。 ;痰标本的处理;痰直接涂片查细菌、真菌：挑选痰液中脓性或带血部分，涂成均匀薄片，进行革兰染色，镜检。 痰涂片查抗酸杆菌：把痰前处理液加入痰标本中，两者比例约2：1，混合均匀，放室温静置10-20min，待粘液完全液化，倒试管离心3000r/min5-10min，取沉淀物涂片抗酸染色镜检。 培养基选择：血平板分离各类细菌特别?溶血链球菌，肺炎链球菌。加万古巧克力于CO2环境分离嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌。麦康凯分离革兰阴性杆菌。真菌培养接种两个TTC-沙氏平板，分别放室温22℃及35℃孵育24-48hr。均需分区划线。 ;粪便标本的处理;真菌培养：将标本接种两个TTC-沙氏平板及血平板，置25℃-30℃和35℃孵育24-48hr。真菌性腹泻多继发于抗生素治疗后，常见有白色假丝酵母菌。 对化验单上明确要求做霍乱弧菌培养以及霍乱弧菌快检阳性的均应做霍乱弧菌培养，以便确诊和做进一步分型。方法是取一环大便标本或碱性蛋白胨水增菌液接种碱性平板或TCBS平板及血平板，要求三区划线，然后置35℃孵箱中孵育。 ;眼耳鼻喉拭子标本的处理;脓液标本的处理（病灶分泌物）;4、培养：血琼脂平板和麦康凯琼脂平板是基础的分离培养基，另外应接种巧克力平板，置CO2环境中孵育，可分离嗜血杆菌和奈瑟菌。以分区划线法接种。 注意：对无菌部位的感染，从分泌物中分离到细菌，一般均有临床意义。 烧伤创面脓液或分泌物中，以铜绿假单胞菌最多见，次为金黄色葡萄球菌，再次为变形杆菌，而大肠埃希菌、肺炎克雷伯、粪产碱杆菌及白色念珠菌感染亦不少见。;无菌体液标本的处理;4、胸水和腹水的涂片在观察时应予注意是单一菌种，还是混合菌感染。因为胸腔和腹腔内器官的感染往往是混合菌引起的。胸水涂片中如见到梭形革兰阴性杆菌，说明有厌氧菌的感染可能，在报告中应表示出来。 5、涂片做抗酸染色很重要，不少感染有结核性的，另外奴卡菌和放线菌是部分抗酸性的，作抗酸染色也有利于发现这类细菌的存在。 ;;生殖系统标本的处理;4、细菌培养：接种血平板，分离一般细菌，麦康凯琼脂平板分离革兰阴性杆菌，巧克力平板放5%-10% CO2环境中可分离淋病奈瑟菌 。以分区划线法接种，置35℃孵育。 5、 真菌培养：将标本接种两个TTC-沙氏平板及血平板，分别放室温22℃及35℃孵育24-48hr。;医院感染环境监测标本的处理;各类环境空气、物体表面、医护人员手培养菌落总数卫生标准;空气中微生物的采集与检测;标本处理：收到平板后立即放35℃ 孵育24hr。 结果判断： 根据奥氏公式：C (cfu/m３)=50000N／AT N - 菌落数 cfu/平板 ， A - 平板面积 cm2， T - 平板暴露时间 min。如果使用7cm直径的平板，暴露10min，则C=130×N。;医疗器械灭菌效果的检测;;物体表面采样检测;标本处理：收到标本后应充分混匀，取20ul液体接种血平板，用接种环像接种尿标本一样划线， 然后置35℃ 孵育24hr。 判断标准：Ⅰ、Ⅱ类区域：细菌总数≤5cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。Ⅲ类区域细菌：总数≤10cfu/cm2，并未检出致病菌为消毒合格。Ⅳ类区域细菌：总数≤1