实验二抗菌药物敏感性试验.ppt

实验二 抗菌药物敏感性试验 张卫军 赵 卓 顾 江 曾 浩 临床微生物学教研室 TEL：753591 药敏试验常用方法 目的要求 了解： 1．稀释法、E-TEST的原理、方法 2．联合药敏试验的结果判读和临床意义 理解： 纸片扩散法（K-B法）原理和注意事项 掌握： 纸片扩散法（K-B法）的操作方法、结果的判读和临床意义 实验材料 实验原理 实验内容 一、操作方法 实验内容 二、纸片扩散法结果判读及临床意义 用游标卡尺量取抑菌圈直径 参照标准解释结果，按抗菌药物敏感性分为敏感、中介和耐药。 实验内容 三、注意事项 1、培养基的质量，如pH、厚度、表面湿度和保存等均会影响抑菌圈大小； 2、药敏纸片的药量、吸水性、直径、保存等会影响测定结果； 3、接种菌量也是影响结果的重要因素； 4、采用标准菌株同时进行药敏试验作为质控； 5、操作因素 思 考 题 1.如何评价抗生素的敏感性？ 2.常用体外药敏试验方法的比较。 稀释法 稀释法 E-TEST E-TEST 联合药敏试验 联合药敏试验 联合药敏试验 抗菌药物敏感试验的意义 可预测抗菌治疗的效果; 指导抗菌药物的临床应用; 监测细菌耐药性,分析耐药菌的变迁,掌握耐药菌感染的流行病学,以控制和预防耐药菌感染的发生和流行。 纸片琼脂扩散法原理 将定量抗菌药敏纸片贴在已接种的测试菌的MH琼脂平板上，纸片所含药物吸收琼脂水分溶解并不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌范围内测试菌生长被抑制而形成的无菌生长抑菌圈，抑菌圈大小反应测试菌对测定药物的敏感性。 临床微生物学教研室 《临床微生物学和微生物检验》实验 验证性实验 1. 纸片扩散法 2. 稀释法 3. E试验 4 .联合药敏实验 重点 难点 水解酪蛋白琼脂（MH琼脂） 培养基 载玻片、无菌生理盐水、镊子、无菌棉签、游标卡尺（毫米尺） 其他 环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素 纸片 大肠埃希菌 菌株 CIZ 50ug/ml ＋ － CIZ 50ug/ml 贴药敏纸片 药物扩散 形成抑菌圈 挑 混 比 涂 贴 量 ≥21 16~20 ≤15 50ug 环丙沙星 ≥15 13~14 ≤12 10ug 庆大霉素 ≥18 15~17 ≤14 30ug 头孢唑林 敏感 中介 耐药 抑菌直径（mm） 含药量 抗菌药物 该抗菌药物在常规给药剂量时达到的体内浓度能抑制或杀灭被测菌 常规剂量的抗微生物药物通常达到的全身浓度不能抑制杀灭被测菌，临床治疗无效 抗菌药物对被测菌MIC接近于血液和组织中可达到的水平，高于正常给药量进行治疗 24mm 15mm 结合稀释法和扩散法原理对微生物药敏试验直接定量的技术 临床微生物学教研室