生物羊膜特点与应用　.ppt

;自Davis(1910)首先利用羊膜作为生物敷料替代皮肤帮助烧伤创面修复以来，羊膜作为一种来源方便、取材容易和价格便宜等诸多优点的生物膜在临床上应用越来越广，如覆盖烧伤的创面；修补阴道缺损；四肢溃疡；脾破裂的修补和肾、胰移植时的包裹材料等等。 Rotth(1940)首次应用新鲜羊膜移植到睑球粘连的患者，开创了羊膜在眼科临床应用的先例，其后有少量的文献报道。 直到Kim和Tseng(1995)改良了羊膜的保存方法，移植到眼表后，用于治疗结膜肿瘤；复发性翼状胬肉切除；睑球粘连青光眼滤过性手术等等，可起到一个良好的生物胶原支架作用。因此，羊膜移植已再次成为眼表重建的一大热点。 ;羊膜的组织结构;羊膜的组织结构; 一般仅将羊膜分为上皮面和基底膜面，上皮面包饶羊水，基质面与绒毛膜之间有一潜在间隙，容易钝性分离。 1.上皮层：羊膜上皮可为单层立方形、在胎儿面上皮为柱状，有时上皮呈假复层，其上皮层内可见退化细胞。上皮细胞内常含有脂肪滴。该层是新鲜的羊膜组织抗原性所在的部位。 2.基底膜层：由狭窄的无细胞网状纤维构成，厚度不一。在胎盘处羊膜的基底膜最厚，该层组织PAS染色呈阳性反应。 ;3.致密层：薄而致密，是羊膜张力所在。此层与基底膜紧密相连，而与下面的纤维母细胞层连接较松。该层由网织纤维组成，HE染色呈淡伊红色均质带。致密层极少因炎症等原因引起水肿、增厚。在羊膜眼表移植后此层的结构能阻止炎症细胞穿透羊膜向病灶区浸润。 4.纤维母细胞层：该层构成羊膜的主要厚度。HE染色为有梭形的淡伊红带。纤维母细胞层染色淡是因为黏液含量高。本层由疏松纤维母细胞和网状纤维构成，纤维母细胞具有吞噬作用。 5.海绵层：由波浪状网织纤维束构成，象其它弹力纤维一样具有伸展性。本层厚度变化大，主要依此层黏液和液体的多少而定。正常厚度为0.02~0.5mm，水肿时可增厚数百倍。;羊膜的作用机制;5个方面的临床效果;人羊膜无HLA-A,B或DR抗原，故抗原性极低，移植至志愿者的皮下，其血液中也没有找到相应的抗体，几乎不发生排斥反应； 人羊膜具有轻度非特异性抗病毒及抗细菌作用，与唇黏膜、鼻黏膜移植相比，移植后发生感染的风险较小 人羊膜具有较强的抗粘连性，这对于严重OSD所引起的睑球粘连和结膜穹隆缩窄十分以来。;羊膜手术适应症;眼表重建时完好的基底膜是非常重要的，而化学伤、热烧伤的患者，其干细胞破坏的同时，多伴有基底膜的破坏，所以在羊膜移植重建的角膜基底膜的基础上行角膜缘干细胞移植，会取得更好的眼表重建效果。 刺激上皮增殖和分化：羊膜中含有各种蛋白成分，如层粘蛋白、纤维连接蛋白、型胶原纤维等，能刺激上皮的分化、增生，增强上皮细胞的黏附性，在上皮创伤愈合中起到重要作用 清除炎症：羊膜中含有各种蛋白酶，通过抑制相应的蛋白酶而发挥其清除炎症的作用；同时羊膜中抑制细胞因子表达和调节细胞凋亡的成分， 可以避免炎细胞和细胞因子诱发的角膜基质和胶原纤维的过度增生因此，在眼表重建时可以抑制局部炎症，促进表面愈合而不留瘢痕。; ; 减少瘢痕形成：羊膜可以快速抑制TGF-β的mRNA表达，而抑制纤维母细胞的形成，因此，羊膜移植在治疗急性Stevens-Johnson综合征和急性碱烧伤中的作用就不难理解。 羊膜中含有抗新生血管化蛋白可以减少新生血管的形成，因此，羊膜移植在眼表重建中应用十分广泛。 修补青光眼滤过泡破损、角膜穿孔、封闭泪小点及眼部整形等。 治疗翼状胬肉:尽管翼状胬肉的确切发病机制尚不明确，部分学者认为它的发病与角膜缘干细胞缺乏有关。临床上采取胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植治疗，取得较为理想的效果。 ;但对于复发性胬肉或缺乏相对正常自体干细胞的患者，许多学者试用羊膜移植治疗翼状胬肉，其术后复发率明显低于单纯切除组。这可能与羊膜本身没有抗原性，不会诱发免疫反应；同时羊膜能抑制炎性反应，阻止新生血管长入；羊膜有接触抑制，本身可以阻止变性结膜组织生长，防止胬肉复发。⑻解决屈光手术引起的角膜混浊(Haze)。 多数人认为角膜混浊的产生与激光手术产生的局部炎症反应及新生上皮产生的多种生长因子引起前基质细胞和胶原的异常增生有关，因此羊膜移植可以减轻手术区域的炎症反应及局部刺激因素，有望减轻角膜混浊。 ⑼作为体外细胞培养的载体：随着角膜缘干细胞理论与实验培养技术的发展羊膜作为没有抗原性、有较好的生物相容性等，使其成为载体的最佳选择，但有关这种上皮羊膜上培养后抗原性改变，移植上皮眼表的分化及功能的维持都需要鸡长时间的探讨。 ;目前羊膜存在的问题;瑞济生物羊膜;羊膜冷冻干燥的概念 　尽可能的保存羊??原有的生物学性能，使羊膜在冷冻的条件下进行真空干燥。 冷冻干燥羊膜的质量要求 　保持羊膜原有的组织结构、原有的基本化学组成、适用于临床要求的组织韧性和生理pH值、含水量低适于常温长期保存。;保护