生物技术制药,单克隆抗体.ppt

生物技术制药 --------------单克隆抗体 一、单克隆抗体的概念 二、单克隆抗体制备 三、生物导弹--单克隆抗体靶向抗肿瘤药物 研究现状 四、人源化单克隆抗体简介 五、展望 一、单克隆抗体的概念 单克隆抗体，简称单抗。是将能分泌特异性抗体的细胞和具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释法及克隆化，使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的细胞。这种抗体是单一的B淋巴细胞克隆产生的，具有对一个抗原决定簇的单一性、特异性、均质性的抗体。 二、单克隆抗体的制备 三、生物导弹----单克隆抗体靶向抗肿瘤药物研究现状  几种单克隆抗体药物 几种单克隆抗体药物 问 题 单抗在疾病诊断方面表现出色，但在治疗癌症等恶性疾病方面的发展却一波三折，步履维艰！ 原因： 1、使人体产生 “人抗鼠抗体” (Human anti mouse antibody，简写HAMA，人体主要针对鼠源性单克隆抗体同种型产生的抗抗体，可诱发人抗鼠抗体反应。） 2、在人体内的半衰期很短，难以维持有效的药物作用靶组织的时间。 四、人源化单克隆抗体 将特异性和亲和力较强的非人源单（主要指鼠源性单抗）进行人源化改造后, 在保持对特异性抗原表位高亲和力的基础上进行人源化改造, 减少异源抗体的免疫原性,有效的避免了人抗鼠抗体反应，此种抗体，即人源化单克隆抗体。 1、人源化抗体的构建 2、人源化抗体的表达 构 建 a、人+鼠嵌合抗体 的构建： 应用DNA 重组技术将小鼠抗体基因上的可变区与人抗体基因的恒定区重组, 再将重组后的基因导入骨髓瘤细胞中表达。根据所用的载体质粒标记基因产物, 选用适当的抗生素或制剂进行筛选, 再用与传统技术相似的方法克隆出分泌人鼠嵌合抗体的细胞株。 b、抗体改性技术的应用： CDR（免疫球蛋白分子的互补决定区）移植的人源化抗体，由于鼠源性抗体中的FR （FR即氨基酸骨架区或氨基酸序列）仍残留一定的免疫原性, 这种抗体还远非真正的人源化抗体, 有些还能产生很强的抗独特型反应。为减少鼠源成分, 人们进一步用人的FR 替代鼠FR, 形成更为完全的人源化抗体, 即除了3 个CDR 是鼠源的外, 其余全部是人源结构, 又称CDR 移植抗体。 2、表 达 多用大肠杆菌体系 、酵母体系、昆虫体系、哺乳动物细胞体系。 人源化单克隆抗体药物 展 望 近年来，单克隆抗体在世界医药市场异军突起! 其市场总销售额大约在35--40亿美元之间。已成为世界生物工程制药业的支柱产品之一。单抗的第二轮开发也正在成为国际生物医药领域的热点。随着具有更高靶向性的单抗和药效更强的“弹头”的出现，今后单抗将发展成为一大类独立医药产品，促进生物制药学的发展。 THE END 目 录 淋巴细胞杂交瘤分为B细胞杂交瘤和T细胞杂交瘤。前者指用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合来制备单克隆抗体, 后者是把T淋巴细胞和胸腺瘤细胞融合来制备抗原特异的淋巴因子和研究细胞免疫的许多问题。用B细胞杂交瘤技术来制备单克隆抗体的简要流程图1 1、单克隆抗体靶向药物 特点： 1、体积小,能更有效地透入肿瘤; 2、其分子小、消除快、累积毒性小; 3、所携带的弹头脱离后,可较快被清除; 4、循环中免疫靶向结合物对靶细胞的竞争作用小； 5、半衰期短、穿透性好; 6、能穿过血脑屏障,因而使单抗偶联物能更好地达到治疗目的。 2、抗肿瘤药物研究现状 研究表明,单抗靶向药物具有很好的疗效, 对移植于裸鼠的相应人体肿瘤生长有抑制作用，具有更高更好的疗效和较低的细胞毒性。与单抗进行偶联并在裸鼠进行疗效观察的抗癌药物有阿霉素、博胺霉素、丝裂霉素、平阳霉素、柔红霉素、苯丁酸氮芥、苯丙酸氮芥、顺铂以及长春新碱等,在治疗肿瘤方面取得了积极的作用。 利用小鼠生产单抗 人源性单抗特点 与表皮生长因子受体（EGFR）具有高亲和性。 (表皮生长因子：参与正常细胞的生长、肿瘤形成。表皮生长因子受体：创伤愈合等过程与表皮生长因子结合的细胞膜受体，具有酪氨酸激酶活性） 具有靶向性强、毒副作用低，并能增强放、化疗的治疗效果。 高度专一性，能够特异性针对肿瘤细胞进行靶向治疗。 人源化抗体步骤