自然科学基金申请书技术路线汇总.doc

技术路线： 临床资料 淋巴瘤患者 病理活检 常规病理组织学诊断与分型 制成单个核 RT-PCR诊断：t（14；18）, t（11；18）,t（11；14）,t（8；14）,t（9；14）,t（2；5）等染色体易位后形成的融合基因 FISH： CCND1，BCL2，BCL6，PAX5， ALK，NPM，MYC，IgH 技术路线 甲基化抑制/启动剂作用EBs后的基因表达分析 ChIP检测H3修饰的位置 免疫组化检测H3R2等的表达 MSP检测Nanog等CpG岛甲基化状态 甲基化修饰检测 FACS检测 免疫组化检测 RT-PCR检测 LN, FN, E-cadherin表达差异检测 EBs形态学观察 流式细胞术、RT-PCR检测 mES分化为EBs mES niche模拟培养 mES非分化增殖 mES标准体系培养 染色体核型分析、AP检测 免疫组化、FACS特异标志物、RT-PCR检测 形态学观察、倍增时间、细胞活率检测 生物学特性检测 生物学特性检测 形态学观察、倍增时间、细胞活率检测 免疫组化、FACS特异标志物、RT-PCR检测 染色体核型分析、AP检测 mES标准体系培养 mES非分化增殖 mES niche模拟培养 mES分化为EBs 流式细胞术、RT-PCR检测 EBs形态学观察 LN, FN, E-cadherin表达差异检测 RT-PCR检测 免疫组化检测 FACS检测 甲基化修饰检测 MSP检测Nanog等CpG岛甲基化状态 免疫组化检测H3R2等的表达 ChIP检测H3修饰的位置 甲基化抑制/启动剂作用EBs后的基因表达分析 铝接触剂量/尿铝含量调查 尿铝含量与年龄和细胞丢失的关系 遗传基因多态性检测 60岁以上铝接触人群及对照 尿铝含量与Caspase-3, LC3-II蛋白表达的关系 外周血淋巴细胞M受体表达 铝致神经细胞丢失和/或遗传因素与MCI、AD的关系 认知功能检查，MCI诊断，AD诊断，脑部核磁及磁共振波谱分析 Nec-1和/或不同死亡通路阻断剂处理 铝致神经细胞死亡的方式检测 神经行为改变 Caspase-3,LC3-II基因/蛋白表达 铝染毒SD大鼠 APP、Tau蛋白水平 氧化应激水平 铝染毒大鼠神经细胞 Nec-1阻断神经细胞坏死性凋亡通路与铝致痴呆的关系 神经细胞凋亡/坏死/坏死性凋亡/自吞噬 研究骨形成到骨吸收质的变化过程中，OB、OC基因调控机理。 骨界面OB、OC基因表达谱的时序变化 提取骨界面取材的OB和OC 体内种植体—骨界面区域的骨组织 骨界面OB、OC基因表达谱的时序变化 RT-PCR法检测OB、OC表达差异最大的几个基因； 结合基因数据库，明确“标记”基因及功能。 体外OB、OC基因表达谱的时序变化 体外OB、OC基因表达谱的时序变化 提取骨界面取材的OB和OC 体内种植体—骨界面区域的骨组织 体外培养的成骨(OB)细胞和破骨细胞(OC) 体外培养的成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC)