第一章-酶工程.ppt

2. Hames-Woolf 作图法 [S]/υ Km /Vm -Km 0 [S] 以[S]/ν对[S]作图得直线，纵轴截距为Km/Vm，横轴截距为-Km，斜率为1/Vm，换算即可求得Vm和Km 。 这种方法的优点是作图点在坐标图中分布较为平均，另外它也 是求Vm的好方法。 酶反应动力学 第一章 酶 工 程 4. Eisenthal-Cornish-Bowden直接线性作图法 把[S]标在横轴的负半轴上，测得的v数值标在纵轴上，相应的[S]和v联成直线，这一簇直线交于一点，其坐标为Km和Vmax。 优点：不需要计算，可直接读出Km和Vmax值；易于识别不正确的观测结果。 酶反应动力学 第一章 酶 工 程 3. Eadie Hofstee 作图法 0 Km /Vm υ Vm Vm / Km 以ν对ν/[S]作图得直线，纵轴截距为Vm，横轴截距为Vm/Km， 斜率为-Km，换算即可求得Km和Vm。 这种方法适用于ν值实验误差较大情况。 酶反应动力学 第一章 酶 工 程 第一章 酶 工 程 思考题： 名词解释：酶工程；转换数；比活力；酶活力； 酶活国际单位；酶反应动力学； 简述酶的研究简史。 简述酶工程的发展概况。 简要回答酶的催化特点。 简要回答影响酶催化作用的因素。 简要回答米氏方程的意义。 酶是生命活动的产物，又是生命活动不可缺少的成分。研究酶与生命活动、代谢调节、遗传疾病以及生长发育的关系，对于阐明生命现象的本质及其规律具有重要的意义。 * 酶的生产和应用的技术过程称为酶工程。酶工程是现代生物技术四大工程技术之一，同其他技术相互交叉，相互促进和发展。酶作为一种生物催化剂，同无机催化剂相比，具有催化效率高、专一性强、反应条件温和等优点，使得酶能够在食品、轻工、医药、化工、能源、环保、科研等领域得到广泛的应用。酶工程技术的研究对于改善人类生活，促进社会发展具有重要的意义。 * 巴斯德,研制出狂犬疫苗,开发低温消毒技术（巴氏杀菌）,提出分子不对称性理论，开创了立体化学研究的途径 李比希,从1901到1910年最早的十次诺贝尔化学奖获得者中，李比希的学生就有7位。 温度影响需要加个图 * 需移动公式 * 这种作图法称为双倒数作图法，应用最为广泛，但其缺点是在[S]较低的一侧，常常测定较为困难， ν值的误差较大；另外在[S]等差值实验时，作图点较集中于纵轴。 * 影响酶催化作用的因素 1. 底物浓度的影响 υ S Vmax Km 1/2Vmax 矩形双曲线：一级反应；混合反应；零级反应。 底物抑制：有些酶在高底物浓度下，速度没有维持较高水平，反而下降的现象 第一章 酶 工 程 酶的催化特点及影响因素 3. 酶浓度的影响 υ=κ· [ E ] 底物浓度够高的条件下，酶催化反应速度与酶浓度成正比。 2. 产物浓度的影响 反馈调节作用：许多代谢途径的中间产物或终产物 是酶的变构剂，使酶变构从而影响其反应速度。 影响酶催化作用的因素 第一章 酶 工 程 酶的催化特点及影响因素 4. 温度的影响 在一定温度范围内，反应速度随温度升高而加快。 超过一定范围，温度的升高导致酶三维结构的变化，甚至变性，催化活性下降 5. pH的影响 T (pH) υ 影响酶催化作用的因素 第一章 酶 工 程 酶的催化特点及影响因素 当酶分子处于最适pH值反应介质中时，使酶促反应速度达到最大值。 6. 抑制剂(inhibitor)的影响 凡能降低酶催化反应速率的物质都称之为抑制剂 抑制剂与酶的必需基团（包括活性基团及辅基）结合，改变 其结构与性质，引起酶反应速率下降 抑制剂对酶有选择性，不包括酶蛋白的水解及变性失活作用 影响酶催化作用的因素 第一章 酶 工 程 酶的催化特点及影响因素 7. 激活剂(activator)的影响 （1）无机离子激活剂：Cl-,Br-,I-,Zn2+,Mg2+,Ca2+,Na+ （2）小分子有机化合物：抗坏血酸，半胱氨酸，谷胱甘肽 （3）生物大分子激活剂：激酶 影响酶催化作用的因素 第一章 酶 工 程 酶的催化特点及影响因素 酶的活力测定 酶活力 又称酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力，酶活力可 用酶催化的某一化学反应的速率来表示。 化学反应的速率可用单位时间内底物的减少量或产物的增 加量来表示。 酶活力的大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的 速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高，反之活 力愈低 第一章 酶 工 程 酶活力单位 酶活力单位是表示酶量多少的单位。 酶活