利用5.8SrRNA-ITS序列发展3种监定外来入侵-农业药物毒物试验所.PDF

研究報告 外來入侵植物南美獨行菜與獨行菜之分子標誌 119 利用5.8S rRNA-ITS 序列發展3 種鑑定外來入侵植物 南美獨行菜 (Lepidium bonariense L.) 與獨行菜 (L. virginicum L.) 之分子標誌 1,2 2 1 1 袁秋英 * 、蘇承鋐 、林李昌 、蔣慕琰 1 行政院農委會農業藥物毒物試驗所公害防治組 2 私立朝陽科技大學生化科技研究所 摘要 酸片段；另可利用核酸差異處之BseY I 及Rsr II 限制酶反應，將南美獨行菜與獨行菜 18S 外來植物的入侵及歸化，常造成棲地生物 rRNA-26S rRNA 之 PCR 核酸片段，切割為 多樣性失衡，也可能影響人畜的健康，或關聯 555 及152 bp 或是551 及157 bp 之多型性條 於進出口農產品貿易及國際利益等因素。因 帶；亦可經由設計專一性探針，延續發展為呈 此，如何建立正確、快速及靈敏的檢測方法， 色系統之核酸晶片檢測法。本研究所建立之 為杜防有害外來植物入侵的重要植物防檢疫工 AS-PCR 分子標誌具有簡易、快速及經濟等特 作。南美獨行菜(Lepidium bonariense L.)為十字 點，適合少量樣品檢測之用；而核酸晶片法適 花科(Brassicaceae) 獨行菜屬一年生草本植 用於高通量樣品的快速檢測，後續可應用於進 物，原產地位於南美洲，現已成為臺灣中部非 口作物種子中夾帶雜草種子之檢驗，或入侵來 耕地的新歸化雜草。由於南美獨行菜與獨行菜 源比對之用，協助外來入侵植物之風險評估、 (L. virginicum L.) 的植株及種子外觀極為相 監測及管理，進而維護臺灣原生物種之生態多 似，易造成形態鑑定上的困擾。分子標誌己普 樣性與平衡。 遍運用於植物種類之鑑別，本研究利用 5.8S 關鍵詞︰南美獨行菜、獨行菜、分子鑑定、 rRNA-ITS 序列之差異，衍生為 AS-PCR 、 核糖體核酸、間隔區、聚合酶鏈鎖 PCR-RFLP 及核酸晶片技術，建立南美獨行菜 反應-限制酶片段長度多型性、等位 與獨行菜之檢測方法。試驗結果顯示南美獨行 基因特異性之聚合酶鏈鎖反應、核 菜及獨行菜 5.8S rRNA-ITS 序列長度分別為 酸晶片。 620 及621 bp ，獨行菜於ITS2 多1 個鹼基，二 者於5.8S rRNA-ITS 序列的一致性(identity)為 98.9% ，僅有6 個鹼基之差異，其中 2 個鹼基 Three Molecular Markers Developed