蚊虫分子分类研究进展.doc

寄生虫与医学昆虫学报 Act a Parasitol . Med. Ento mol . Sin . 第 3 卷 第 1 期 1996 年 3 月 Vol13 , No . 1 Mar . , 1996 蚊虫分子分类研究进展 3 瞿逢伊 ( 第二军医大学寄生虫学教研室 , 上海 200433) 一 、蚊虫分类学的历史发展 (一) 蚊虫分类学的发展与停滞 近代蚊虫分类学研究从林奈用双名法命名尖音库蚊 ( Culex pi piens Linnaeus , 1758) 以来 , 迄今将近 240 年历史 。全世界蚊科 ( Culicidae) 种 类包括按蚊亚科 ( Anop helinae) 、库蚊亚科 ( Culicinae) 和巨蚊 亚 科 ( To xo r hynchitinae) 等 3 亚科 38 属 , 约 3209 个独立种 ( Ward , 1992) 。我国蚊类近代研究从秉农山 ( 秉志) 1915 年的疟蚊研究算起 , 迄今亦有 80 年历史 ( 刘淦芝 , 1983) 。冯兰洲 ( 1938) 中国蚊 虫名录列有 12 属 98 种 , 而现今记录达 18 属 350 种以上 (瞿逢伊 , 1990) 。蚊虫分类学虽 属基础理论研究 , 但它与蚊媒病密切相关 , 正确的蚊种鉴定为判定媒介和防治提供科学依 据 。由于蚊媒病防治工作的需要 , 蚊虫分类研究很受重视 , 蚊种记录不断增加 , 形成以宏 观形态为基础的传统分类体系 。综上 200 多年形态分类发展期 , 成绩很大 , 但随着研究工 作的深入 , 现用形态分类方法不能适应蚊虫复合体近缘种鉴别等的需要 , 处于停滞状态 , 必需探索新路 。 (二) 学科间技术渗透为蚊虫分类增添活力 50 年代末期开始 , 细胞染色体分类技术 在蚊虫分类中应用 , 对发现蚊虫复合体及解决各成员种鉴别起着积极的作用 , 但染色体分 类在取材技术等方面存在不少困难 , 使用范围局限 , 必须继续寻找更简捷的方法 。专家们 相继运用遗传杂交技术 , 酶谱技术 , 化学仪器分析技术 , 以及分子生物学技术进行蚊种鉴 别研究 ( White , 1984 ; 瞿逢伊 , 1990) 。虽然许多研究的方法不能推广应用 , 但是 20 多 年来多学科技术渗透进入蚊虫分类研究 , 学术思想空前活跃 , 使从事蚊虫分类研究的专家 感到传统分类的不足 , 传统的蚊虫分类必须增添新的技术手段 , 才有活力 , 才能逐步完 善 , 才能适应新时代的需要 。 (三) 分子分类的应用将使蚊虫分类学进入分子信息基础的新时代 当前 , 蚊虫分类 学面临技术老化 , 难以适应新形势的要求 ; 蚊种形态标志常混淆不清 , 特别是复合体近缘 种的鉴别更为困难 ; 虽然研究了许多新技术新方法 , 尚不能作为分类鉴定常规应用 , 处于 困难的探索研究阶段 。 近 20 年来分子生物学技术迅猛发展 , 显示其在蚊类鉴别应用中的极大潜力 , 为蚊虫 分类学研究提供了许多新思路新方法 , 成为解决当前分类难题的新钥匙 。在继承传统分类 体系的基础上 ,充分运用分子生物学技术获得遗传信息 ,探索蚊种或种群的基因鉴别标 本文于 1995 年 11 月 21 日收到 。 3 本文曾在中国昆虫学会第四届全国医学昆虫学学术讨论会报告 。 ·58 · 志 , 阐明其自然系谱关系 , 为改进蚊虫分类体系提供科学依据 。 分子分类方法依据蛋白质 、染色体 、核酸为材料 , 运用同工酶电泳技术 , 免疫技术 , 分子细胞学技术 , DNA 杂交 , 酶切片段分析及测序等技术 , 进行对比分析鉴别 。它主要 应用于物种鉴别 、种 群 基 因 结 构 分 析 、系 统 发 育 关 系 重 建 等 三 方 面 ( Hillis Mo rit x , 1990) 。上述问题的阐明 , 将使蚊虫分类进入崭新的以分子信息为基础的新时代 。 二 、蚊虫分子分类研究现状 (一) 蚊种分子鉴别研究 分子分类学是在 80 年代晚期发展起来的新兴学科 , 关于蚊类的分子鉴别 , 目前尚处 于实验研究阶段 , 多着重对传统形态分类鉴别有困难的病媒蚊虫复合体探索分子鉴别方 法 , 主要有以下各方面 : 1 . DNA 探针 : 众所周知 , DNA 是各种生物的遗传信息载体 , 研究蚊虫的 DNA , 也就是研究其遗传 核心物质 , 因而 DNA 探针显示高度的特异性 、精确性和敏感性 。目前所用 DNA 探针根 据制备方法不同 , 可分为基因组克隆探针和人工合