血型抗体检测与新生儿溶血病.ppt

血型抗体检测与新生儿溶血病 血型抗体定义 抗体(antibody)是机体在抗原物质刺激下,经过免疫应答,由浆细胞产生的免疫球蛋白,具有与相应抗原发生抗原、抗体反应的能力. 血型抗体包括IgM、IgG和IgA，其中IgA不多见，且常与IgG共存，故血型抗体主要是IgM和IgG。 根据重链二硫键数目和位置，抗体还可分亚类，如IgG包括IgG1,IgG2,IgG3,IgG4四个亚类，不同亚类激活补体及通过胎盘能力不同，IgG2通过胎盘能力最差。 血型抗体分类 按免疫球蛋白的特点 IgM IgG IgA 分子量 950000 150000 180000 56℃3h处理 活性减弱 不受影响 不受影响 2-Me处理 降解 不受影响 部分降解 固定补体 能 能 不能 通过胎盘 不能 能 不能 血型物质的作用 易被中和 难被中和 血型抗体分类 按抗体产生原因和条件 天然抗体（natural antibody）：也是机体对抗原免疫应答的产物，只是没有可觉察的抗原刺激，并非天然产生的抗体。主要存在于ABO, MN, P, Lewis。产生机制可能与环境中广泛存在的菌类、花粉、尘埃等有关，这些物质与某些抗原有共同成分，通过隐性刺激产生血型抗体。 免疫抗体：有可查知的抗原刺激而产生，一般通过输血、妊娠、注射3种方式引入抗原。血型不相容的输血是很强的免疫刺激，输入受血者体内没有的血型抗原，可能产生相应抗体。 血型抗体分类 按抗体产生规律 规则抗体：ABO系统产生抗A、抗B是有规律的，即A型人产生抗B，B型人产生抗A，O型人产生抗A和抗B，这是符合Landsteiner规则的，称为规则抗体（regular antibody）。 不规则抗体(irregular antibody)：除ABO系统外，其它系统产生的抗体均无此规律，称为不规则抗体或意外抗体，不规则抗体通称意外抗体(unexpected antibody)。 血型抗体分类 按在盐水介质中与相应抗原是否凝集 完全抗体(complete ab)：在盐水介质中能凝集红细胞，又称盐水抗体，多为IgM抗体。 不完全抗体(incomplete ab)：能使红细胞致敏，但在盐水中不能凝集红细胞的抗体，多为IgG，通过抗球蛋白法或其它非盐水介质法检测。 血型抗体分类 按免疫球蛋白结构差别 同种型 : 种属特异性标志 同种异型 : 个体特异性标志 个体基因型 : 机体免疫调节网络 血型抗体分类 总结 天然抗体 规则抗体 IgM抗体 完全抗体 盐水抗体 多为冷抗体 同种抗体 免疫抗体 不规则抗体 IgG抗体 不完全抗体 意外抗体 多为温抗体 自身抗体:包括冷抗体和温抗体 血型抗体的临床意义 并非所有血型抗体都有临床意义。一般来说，在37℃不与红细胞发生反应的抗体无临床意义。 能够引起红细胞存活期缩短、新生儿溶血病、溶血反应的抗体具有临床意义。对于有临床意义的抗体，输血时应选择相应抗原阴性的红细胞。 对于无临床意义的抗体，输血时选择交叉配血相合的红细胞即可。 抗人球蛋白试验 抗球蛋白试验是1945年由Coombs等人建立的，又称Coombs试验。抗球蛋白试验的建立在血型血清学上有着非常重要的意义。 分为直接抗球蛋白试验（DAT）和间接抗球蛋白试验（IAT）。 抗人球蛋白试验原理 IgG类血型抗体（如Rh血型抗体）分子量小，与红细胞相应抗原结合后，在盐水介质中不出现肉眼可见的凝集反应，是一种不完全抗体，但在加入抗人球蛋白后，以其搭桥作用则可出现凝集反应。 补体成分在体内被红细胞抗原抗体复合物激活以后，结合在红细胞表面。在体外含补体的多克隆抗体，或抗C3b、抗C3d等单特异性抗体与补体致敏的红细胞反应，产生的凝集或溶血也称为抗球蛋白试验。 DAT阳性的意义 正常人可出现DAT阳性，但没有溶血表现。 内源性红细胞被致敏 近期输过红细胞 近期输过血浆 母婴血型不合 药物引起红细胞致敏 丙球蛋白过高 直接抗人球蛋白试验 DAT是用来检测体内红细胞致敏情况，尤其是IgG和C3d包被的红细胞。 用于： HDN和自身免疫溶血性贫血的诊断 红细胞被药物抗体致敏的检查 迟发性溶血性输血反应的检查 间接抗人球蛋白试验 用于测定在体外能引起红细胞致敏的抗体。 用不完全抗体测定红细胞血型，如Rh血型。 交叉配血。 注意事项 每次试验要设有阴性和阳性对照。 阴性结果要加入一滴IgG致敏红细胞 实验器材清洁。 注意抗原抗体比例、孵育时间、温度等条件。 严格按照实验方法操作。 排除自身抗体干扰。 抗体筛选和鉴定 目的： 筛查出能引起新生儿溶血病、引发溶血性输血反应