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第六章 胚胎移植
哺乳动物的卵巢仅能排出不到0.1%的卵子,大部分在发育中闭锁。 采用超数排卵技术可使闭锁卵泡内的卵子得以成熟,并加以利用。 超数排卵的基本原理 第三节 胚胎移植的基本程序 第三节 胚胎移植的基本程序 第三节 胚胎移植的基本程序 停留在第一次减数分裂前期 停留在第二次减数分裂中期 青春期至更年期的每个月 生理状况下正常排卵数的保持原因: 正常垂体分泌的FSH只能保证一个或部分卵泡成熟。 最大的卵泡能产生更多的雌二醇,正反馈可摄取更多的FSH,保证卵泡发育成熟。 较大卵泡的卵泡液中的FSH受体结合抑制物,使发育慢的卵泡闭锁。 第三节 胚胎移植的基本程序 在卵泡闭锁开始之前,即排卵前的3~5天,给予外源性FSH,可挽救那些将要闭锁退化的卵泡,使更多的卵泡和卵母细胞发育成熟,诱导超数排卵。 第三节 胚胎移植的基本程序 超排处理的一般处理程序 1.已知发情周期的母畜超排 (1)发情开始前4~5天,注射促性腺激素进行超排。此时黄体接近退化,不需要使用前列腺素。 (2)功能黄体期,注射促性腺激素进行超排,需要使用前列腺素溶解黄体,使发情时间一致, 第三节 胚胎移植的基本程序 2.未知发情周期的母畜超排 先注射前列腺素或孕激素,抑制发情,撤除后即可引起发情,然后注射促性腺激素进行诱导超排。 第三节 胚胎移植的基本程序 重复超数排卵的注意事项 应间隔2个以上情期。 供体在回收1-2次胚胎后,应让其配种妊娠,以维持生殖器官正常。 术后造成生殖器官多量出血者,术后粘连率增高,不宜再进行超排处理。 第一次超排效果不好者,当年不宜再超排。 第三节 胚胎移植的基本程序 三、受体同期发情 供体和受体的发情同步差应在±1天的范围内。 以受体与供体在同一天或比供体晚一天(相当于0~-24h)的成功率较高。 第三节 胚胎移植的基本程序 Synchronization between donor and recipient供受体同期发情 -2 -1 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Recipient ovulates from 0 to 1 days after donor Donor ovulates Flush Donor Suitable recipient can ovulate from the same day or 1 days after the donor mare. Recipient Day Post-Ovulation ranges from day 5 to day 8. Synchrony ranges from 0 to +1 第三节 胚胎移植的基本程序 常用于同期发情的药物 抑制卵泡发育的制剂:孕激素 溶解黄体的制剂:前列腺素 促使卵泡发育成熟和排卵制剂:促性腺激素 基础药物 一般不单独使用配合基础药物使用, 使同期发情有较好的准确性和同期性。 第三节 胚胎移植的基本程序 同期发情处理两类方法 1、连续给予孕激素及其类似物, 抑制母畜发情, 一定时期后同时停药。 实际是人为地延长其黄体期, 延长发情周期。 2、使用前列腺素及其类似物, 加速功能性黄体的消退,以达到同期发情。 缩短发情周期, 使母畜的发情期提早出现。 第三节 胚胎移植的基本程序 四、胚胎回收和质量鉴定 胚胎回收(embryo collection):把胚胎(受精卵)从供体的生殖道中冲洗出来。 冲卵液---改良杜氏PBS。 胚胎体外保存液体--- 含15~20%血清的PBS。 胚胎回收时间---在囊胚及以前。 早期胚胎发育阶段较高者,移植后受体妊娠率较高。一般选择密集桑椹胚-囊胚。 第三节 胚胎移植的基本程序 胚胎回收的方法 1、离体生殖道回收(小动物如鼠) 无菌采取输卵管(子宫角),解剖镜下撕开并冲洗出胚胎。 回收进入子宫的胚胎,将生殖道分离,剪去输卵管,将子宫角放入平皿,冲洗两侧子宫腔得到胚胎。 第三节 胚胎移植的基本程序 2、手术回收(中等动物如羊、猪、兔等) 胚胎回收率高,对动物损伤大。手术不当会导致供体不孕。 3、非手术回收(大家畜) 借助专用器械,经阴道和子宫颈到达子宫角采集胚胎的方法。 第三节 胚胎移植的基本程序 输卵管手术回收 子宫角手术回收 第三节 胚胎移植的基本程序 三通路非手术回收胚胎 第三节 胚胎移植的基本程序 第三节 胚胎移植的基本程序 胚胎检查和鉴定 第三节 胚胎移植的基本程序 LOGO 第六章 胚胎移植 Embryo Transfer 又称受精卵移植,即将胚胎从供体移植到另外一头受体雌性动物产下供体的后代的过程。 对一雌性动物(供体)进行超数排卵处理
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