蛋白质药物中免疫球蛋白的生产工艺 马成伟 20094082218.pptx

蛋白质药物中免疫球蛋白的生产工艺学号:20094082218班级:09级生物工程（2）班姓名:马成伟免疫球蛋白的性质免疫球蛋白具有所有蛋白质的通性，它的活性受到热、酸、碱等的影响。因此，在分离制备时，应保障其在分离制备条件下的稳定性。其粗品的免疫活力一般在低于57℃时，几乎没有变化，但从57℃开始降低，将近80℃时基本失活；过酸或过碱都会造成免疫球蛋白变性失活。杨严峻等（1996）研究发现，免疫球蛋白的耐热性与其纯度有关，纯度越高，其耐热性就越差。因此在分离制备Ig时不仅要考虑温度对Ig活力的影响，纯度也是要重点考虑的因素，而且对纯度的要求也越来越高。结构Ig 分子的基本结构是由四肽链组成的，即由二条相同的分子量较小的轻链（L 链）和二条相同的分子量较大的重链（H 链）组成的。L链与H链是由二硫键连接形成一个四肽链分子，称为Ig分子的单体，是构成免疫球蛋白分子的基本结构。现已知5 种免疫球蛋白中IgG、IgA 和IgD的H链各有一个可变区（VH）和三个恒定区（CH1、CH2 和CH3）共四个/view/402855.htm功能区。IgM和IgE 的H链各有一个可变区（VH）和四个恒定区（CHl、CH2、CH3 和CH4）共五个功能区。VL和VH 是与抗原结合的部位，单体由一对L链和一对H链组成的基本结构，结构只有2 个与抗原结合的位点，如IgG、IgD、IgE、/view/1074410.htm血清型IgA；/view/1217781.htm双体由J链连接的两个单体，有4 个与抗原结合的位点，如/view/3847860.htm分泌型/view/3847860.htmIgA（SIgA），所以SigA 结合抗原的亲合力要比血清型IgA 高。五聚体由J 链和二硫键连接五个单体，如IgM。五聚体IgM 理论上应为10 个与抗原结合的位点，但实际上由于立体构型的空间位阻，—般只有5 个结合点可结合。H和L链上都有可变区，同类重链和同型轻链的近N端约110个/view/15155.htm氨基酸序列的变化结构很大，其他部分的氨基酸序列相对恒定，据此可将轻链和重链区分为可变区（V）和恒定（C）。VH和VI。各有3个区域的氨基酸组成和排列顺序高度变化，称为/view/2155725.htm高变区(HVR）或互补决定区（CDR），分别为CDRl、CDR2和CDR3。CDR以外区域的氨基酸组成和排列顺序相对不易变化，称为骨架区（FR）。VH和VI。各有113和107个/view/687343.htm氨基酸残基，组成4个FR（分别为FRl、FR2、FR3和FR4）和3个CDRs。VH和VI-中的各氨基酸可编号，一些保守的氨基酸都有其固定的编号位置，将不同序列和已编号的序列进行对比以后，结构在某个位置上多出来氨基酸编号为A、B、C等，如27A、27B、27C、106A等。VH和VL的3个CDR共同组成Ig的/view/3847877.htm抗原结合部位，识别及结合抗原，并决定抗体识别的特异性。白蛋白及人丙种球蛋白的生产工艺流程 生产工艺[盐析][超滤]上清液浓缩液盐析物pH=7.02~6℃除盐[除菌] [络合]利凡诺，pH=8.6人血丙种球蛋白处理液过滤人血浆 [解离]0.5mol/L HCl固液分离浓缩[热处理]络合物解离液浓缩液60℃，10h超滤[除菌]热处理液白蛋白检测方法 验、毒性试验、热 原试验符合标准 性状：无色或淡褐色的澄明液体，微带乳光，不含异物或 摇不散的沉淀，pH=6.6~7.4 含量：丙种球蛋白含量应占蛋白质含量的95%以上 稳定性：在57℃加热4h不得出现结冻现象或絮状物 防腐剂含量：酚含量≤0.25%，硫柳≤0.005% 固体总量：制品中固体总量百分数与蛋白质含量百分数之差不得大于2% 用途 残余硫酸铵含量：≤0.1% 其他:无菌试验、防腐剂试验、安全试验、热原试验应符合规定 用途 原发性免疫球蛋白缺乏症，如X联锁低免疫球蛋白血症，常见变异性免疫缺陷病，免疫球蛋白G亚型缺陷病等。 继发性免疫球蛋白缺陷病，如重症感染，新生儿败血症等。 自身免疫性疾病，如原发性血小板减少性紫癜，川崎病。 谢谢观赏