3、医疗器械的无菌和初始污染菌检验PPT.ppt

医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） 由于无菌检验时间跨度较长，因此过程的记录应能够完整体现试验的全过程，对于在试验过程中出现的各种情况，均应在记录中客观反映。 直接接种法试验结果 薄膜过滤法试验结果 无菌检查法 判定 试验报告中宜给出下列信息： 供试品名称； 生产批号和（或）灭菌批号； 供试液制备方法； 接种方式； 每日观察结果（包括阴、阳性对照）； 结果判定 试验报告 （1）培养基配制记录 （2）灭菌器、天平等仪器的使用记录 （3）培养基无菌性检查、灵敏度检查记录 （4）菌种购买、传代、使用记录 （5）方法学验证记录 （6）无菌试验记录 （7）灭菌物品制作 （8）废弃物处理记录 （9）洁净间监测记录 医疗器械无菌检验应有记录 一、适用范围 二、检查内容 1.选择的无菌检验方法 2.检验人员 资质 3.现场察看无菌实验室环境 4.设备和器具 5.管理制度、操作规程等相关技术文件 6. 查阅试验记录 三、其它应注意的问题 医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） （1）培养基制备 （2）供试品的无菌检查 （3）培养及观察 （4）结果判断 （1）样品记录 （2）灭菌物品制作记录 （3）原始试验记录 （4）废弃物处理记录 医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） 其它应注意的问题还包括： 生产企业应确保样品具有代表性：试验样品应从常规产品中能够代表加工过程和条件的批中选择。选择样品是随机的。试验样品的选择和处理技术应明确，以免对样品上所含的微生物的数量和种类造成污染和改变。试验样品可以选择制造过程中的不合格产品，它们应该代表这个生产批的加工程序和条件。用于试验的不合格产品应不会影响无菌测试的有效性。 医疗器械无菌试验检查要点指南（2010版） 其它应注意的问题还包括： 生产企业对于供试品的选取、转移过程要采取防止污染措施，确保试验结果的可靠性。选取制作供试品的试验样品时，样品包装须完好无损，尤其是只有一层包装的样品。进入无菌检验室的样品若有两层（或两层以上）包装的，需将外包装在传递窗（或缓冲间）拆除后，传入实验室。 无菌检查法 试验前准备 培养基: 无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基等应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。 ???????? 无菌性检查????每批培养基随机不少于5支（瓶），培养14天，应无菌生长。 培养基的适用性检查 灵敏度检查：????????????????????????????????????????? ????????菌种???培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特性。 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus?? aureus)［CMCC（B） 26?003］ ?铜绿假单胞菌??? (Pseudomonas? aeruginosa)?［CMCC（B） 10? 104］ ?枯草芽孢杆菌??? (Bacillus? subtilis?)????????????????［CMCC（B） 63? 501］ ?生孢梭菌?????????(Clostridiumsporogenes)????????????[CMCC(B)?????????64? 941] ?白色念珠菌?????? (Candidaalbicans)???????????????????????[CMCC(F)?????????98?? 001]　 黑曲霉???????????(Aspergillus?? niger? )　　　　???[CMCC(F)?????????98?? 003] 培养基的适用性检查 菌液制备： ????????????????????????????????????????? ???????? 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30℃～35℃培养18小时～24小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上，（23～28）℃培养（24～48）小时，上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1mL 含菌数小于100cfu（菌落形成单位）的菌悬液。 培养基的适用性检查 菌液制备：接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，（23～28）℃培养（5～7）天，加入 （3～5）mL含0.05％（v/v）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05％（v/v