枳实炮制方法研究.docVIP

精品论文 参考文献 枳实炮制方法研究 赵玉静（沈阳市皇姑区亚明社区卫生服务中心 辽宁沈阳 110031 ） 　　【摘要】目的 研究枳实的炮制方法。方法 利用甲醇提取，通过聚酰胺柱，用水洗脱，提取枳实中的辛弗林，并用HPLC方法对其进行测定，并对枳实生品及麸炒品中辛弗林进行测定和比较。结果: 烘制、麸炒过程对枳实中辛弗林含量有一定的影响，烘制的方法作为枳实的炮制法具有可行性。 　　【关键词】辛弗林；HPLC 　　【中图分类号】R28 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085（2014）15-0274-02 　　枳实为临床常用中药，为芸香科植物酸橙CitrusaurantiumL.及其栽培变种或甜橙CitrussinensisOsbeck的干燥幼果。具有破气消积，化痰散痞等功效。临床用于积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通，痰滞气阻，胸痹，结胸，脏器下垂。鉴于枳实的良好活性作用，对枳实进行系统研究。本研究旨在研究传统炮制过程对枳实有效成分的影响。根据报道，枳实的主要有效成分为生物碱类的辛弗林，因此本实验研究炮制工艺对枳实辛弗林化学成分的变化，同时研究烘制法对枳实辛弗林化学成分的影响，确定枳实的炮制条件。 　　1.仪器与试剂： 　　1.1　仪器P230II大连依利特（UV230II紫外检测器，EC2006-色谱数据处理工作站)，KQ3200超声波清洗器(江苏昆山) 　　1.2　试药 枳实药材(产地江西，经鉴定为芸香科植物酸橙及其栽培变种或甜橙的干燥幼果)；辛弗林对照品(中国药品生物制品检定所，纯度gt;98%)；高效液相色谱用水为纯净水，甲醇为色谱纯；磷酸二氢钾、十二烷基磺酸钠、冰醋酸等试剂为分析纯。 　　2.方法与结果 　　2.1 辛弗林的含量测定方法 　　2.1.1 色谱条件 Welch Ultimate LP-C18 (250mmtimes;4.6mm，5mu;m)；流动相：甲醇-磷酸二氢钾溶液(取磷酸二氢钾0.6g，十二烷基磺酸钠1.0g，冰醋酸1ml，加水溶解并稀释至1000m1)(50：50)为流动相，检测波长：275nm，流速：1.0mL/min；柱温：30℃。 　　2.1.2 供试品溶液制备[3] 取本品中粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率240W，频率45kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过聚酰胺柱(60～90目，2.5g，内径为l.5cm，干法装柱)，用水25ml洗脱，收集洗脱液，转移至25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。 　　2.1.3 对照品溶液制备[3] 辛弗林对照品适量，精密称定，加水制成每1 ml含30mu;g的溶液，即得。 　　2.1.4 空白试验 吸取溶剂20mu;l，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，结果无干扰。 　　2.1.5 测定结果 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液20mu;L。依次进样，在上述色谱条件下测定，记录色谱图，如下（图1，2）。 　　图1 对照品的HPLC色谱图 　　图2.供试品样1的HPLC图谱 　　图3. 空白试验HPLC图谱 　　2.2含量测定方法学考察 　　2.2.1标准曲线的绘制 精密称取辛弗林对照品适量，加甲醇制成0.028mg/ml的溶液。精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别至于10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。分别量取20mu;l，注入HPLC色谱仪中，按上述色谱条件测定，测定峰面积。以对照品溶液的进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。得回归方程：Y= 469.777492 X-8.046891，r=0.9997。结果表明，辛弗林在0.28~1.40mu;g之间峰面积于进样质量有良好的线性关系。 　　表1线性范围试验结果 　　图4.标准曲线及线性范围 　　2.2.2 精密度试验 精密吸取对照品溶液，按照“标准曲线的绘制”项下，依法连续测定6次，RSD 为0.50%，表明本方法精密度良好 。 　　2.2.3稳定性试验 取同一供试品溶液，于0、2、4、6、8、10h测定辛弗林色谱峰面积，测定结果RSD为1.05%，结果表明，溶液在10h内基本稳定。 　　2.2.4. 重复性试验 取样品，按2.1项下供试品溶液制备，根据2.3项下色谱条件及检测方法测定5次，记录峰面积，测定结果RSD为1.01%，表明方法重复性良好。 　　2.2.5回收率试验　分别精密称取枳实样品1g，加3.5mg/ml对照品1ml，按2.1.2项下方法处理，按2.1.1项下色谱条件进行测