抗体的种类.ppt

1、抗体（antibody, Ab) 抗原刺激B细胞后分化增殖为浆细胞合成和分泌的, 能与抗原发生特异性结合并具有多种免疫功能的球蛋白。 2、免疫球蛋白 (immunoglobulin，Ig) 将具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，统称为免疫球蛋白。 包括骨髓瘤、巨球蛋白血症等患者血清中尚未证实有抗体活性的异常免疫球蛋白、免疫球蛋白亚单位等。 3. Ab与Ig的区别 4 抗抗体和抗独特型抗体 1 以免疫球蛋白作为抗原免疫动物产生的抗体。 2 以免疫球蛋白独特型作为抗原免疫动物产生的抗体。 第二节 免疫球蛋白的结构 一、基本结构 由四条多肽链 (重链及轻链各两条) 经二硫键连接起来 (一)重链（heavy chain) 分子量55～75KD，由420-460个氨基酸组成。 根据重链特性的不同，可将其分为α、γ、μ、δ、ε五种。 据此将免疫球蛋白分为五类。 N端第1个功能区为重链的可变区(variable region of heavy chain, VH) VH中的31-35、50-65、95-102段为超变区（hyper variable region, HR) CH1：遗传标志 CH2：与补体活化及通过胎盘有关 CH3：固定组织细胞 CH3与CH4：可与Fc受体结合 绞链区的作用 (二) 轻链 可分为κ链及λ链两种。 同一单体中两条轻链是相同的，但不同的分子中其组成不同，人体内免疫球蛋白中κ链占65%，λ链占35%。 功能区: 可变区(VL):超变区及抗体互补决定区 恒定区(CL) 二、酶解片断 1. 木瓜酶 单体绞链区，水解产物为 2个Fab片段及一个Fc片段。 Fab片段(抗原结合片段):含有一条完整的轻链及重链的一部分，能与相应抗原特异结合，但是单价性的（只能结合抗原，不能凝集或沉淀）。 Fc片段(可结晶片段):不能与抗原结合，但具有多种生物学活性，结合补体、固定细胞、通过胎盘等。 2. 胃蛋白酶 作用于绞链区的第一个二硫键的下方酶解后形成F(ab’)2及pFc两个片段。 F(ab’)2：是两个Fab由一个二硫键结合在一起形成的双体，经还原后便分解为两个Fab，F(ab’)2具有双价抗体活性,与抗原结合后能形成沉淀或凝集。 pFc：小分子肽，不具有任何生物学活性。 三 免疫球蛋白的血清型 免疫球蛋白生化本质上属于大分子蛋白质（具有抗体活性及表位） 根据其本身具有的多种抗原决定簇(表位） 可采用血清学方法(相应的抗体)加以鉴定，称为免疫球蛋白的血清学类型 同种型、同种异型和独特型 （一）、同种型 同一种系的所有个体的免疫球蛋白所共有的抗原特异性。 根据免疫球蛋白H链的抗原决定簇不同，可分为不同的类、亚类。 根据L链的抗原决定簇不同，将其分为型及亚型。 1、 类与亚类 根据CH链结构的差异可将免疫球蛋白分为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五大类, 每大类又可以分为若干个亚类。 2、 型及亚型 根据免疫球蛋白CL链的结构可将免疫球蛋白分为κ及λ两个型。 （二）、同种异型 同种系的不同个体之间,同一类、亚类、型、 亚型的免疫球蛋白，在结构上可能会有一个或数个氨基酸的差异, 称为同种异型。 反应在CH、CL上一个或数个氨基酸的差异，是由不同个体的遗传基因决定的，又叫遗传标志。 IgG1,IgG2,IgG3重链的遗传标志称为Gm因子， 位于CH1－CH3之间。 Am因子：IgAα2链；Km因子： κ链。 （三）、独特型 同一个体内不同的B细胞产生的免疫球蛋白,由于重链及轻链的可变区 (尤其是超变区)氨基酸组成的差异, 导致的抗原特异性为Ig的独特型。 一、Ig M 二、Ig A 血清型: 单体结构 分泌型: 由J链连接的双体再加上一个分泌片组成。分泌片可以保护粘膜分泌液中蛋白酶对其的破坏作用。 三、Ig G、IgD、IgE 五、Ig的功能 一、结合抗原 抗原抗体特异性结合 B细胞表面抗原受体（膜抗体） 二、结合补体 三、结合Fc受体 四、具有抗原性 第二节 抗体的产生 1免疫原制备 2 免疫程序 3 免疫动物 4抗血清分离 5 抗体纯化 免疫抗原制备 纯化抗原 佐剂如何 免疫程序 动物选择 免疫剂量 免疫途径 免疫时间 血清采集 小白鼠采血 家兔采血 山羊采血 采血时间 血清的分离和保存 抗体纯化 盐析 透析 层析 单克隆抗体制备 杂交瘤细胞产生的只针对一个抗原表位的抗体。 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 免疫学教研室 四 各类免疫球蛋白的结构 由五个单体免疫球蛋白经J链及二硫键连接而成 免疫学教研室 免疫学教研室 免疫学教研室 1.感应阶段： B2细胞通过BCR识别TD-Ag的构象决定簇，此为第一信号。