科研项目的策划与实施医学科学研究入门演示课件.ppt

;科研项目的策划与实施;组织策划;充分的准备-书面准备工作 ;充分的准备-实验准备;实验室的安全;化学试剂的安全使用;放射性同位素的安全防护 ;生物的安全防护 ;科研项目的策划与实施;实验的实施;预实验的目的; 某课题在观察基因修饰的骨髓干细胞对Fischer 344大鼠骨髓重建影响的研究中，研究者仅参照文献报道中其他品系大鼠及小鼠骨髓抑制模型在建模时使用的钴60照射剂量，确定了照射方案，未经预实验而直接开始正式实验。结果在随后“正式”实验中，因所选照射剂量不适合该品系鼠，多数模型鼠在极短时间内死亡，故无法观察处理因素产生的效应结果。 ;预　实　验; 以传染或毒性因子为例，在观测实验中, 采用稀释度间隔很大(如100倍), 用于每一稀释度的动物很少（如两头）的策略。取得结果后，在可能有作用的滴定终点两侧再选择间隔小(如5倍)的稀释度, 同时使用较大数量的动物 (如5只)。通过此方法，可用最少量动物而获得准确的结果。 ;实验的实施;正　式　实　验;Nat Immunol. 2004 Nov;5(11):1124-33.;正　式　实　验;实 验 误 差;实验操作规程的规范化;标准物的选择：为建立标准实验体系，选择标准品，并在预实验中利用标准品确定各种实验条件（包括最佳剂量、最佳时间和判断标准等）。然后，以此数据作为测试样品的标准定量或定性参数。（蛋白定量、信号分子磷酸化） 操作程序的控制：建立标准操作流程，实验操作人员仅进行机械性操作，无需任何想象、设计和预测，故要求在操作之间制定严密的操作流程和设计方案。（随机性是造成实验误差的最常见原因，如电话及其它无关事情的干扰；协调标准化和灵活性） 试剂仪器的选择：实验过程中应采用同一厂商相同批号或相同规格的试剂，以基本保证不同批次实验的差异并非由试剂所致。仪器规格、型号也可能影响实验。 ;正　式　实　验;实验的实施;实验记录的意义;实验记录的内容;实验记录的书写要求-基本要求 ;实验记录的书写要求-基本要求 ;实验记录的书写要求- 实验数据的记录;各种操作流程的记录：各种操作流程均需记载于记录本上，简单的流程可直接记载，复杂的流程可打印后粘贴到记录本。 摸索实验方法的记录 ：第一次引用某方法时应注明其出处。若首次使用某种成分或方法，应进行详细描述。凡摸索实验方法的记录均应尽可能完全，宜详细记录每一实验条件的确定过程，以便最后确定标准实验操作流程。须特别注意试剂的具体用量和浓度。 一旦建立标准的实验流程，即可形成完整的protocol，日后进行同一实验流程时，除首次记录完整的protocol外，其余仅记载实验中改动的步骤，并表明所参照protocol的具体名称和出处即可。 ;实验记录注意的问题;实验资料的保存 ;实验的实施;观察中常见的问题;实验观察类型;实验观察的原则;科学观察;培养科学观察习惯，提高科学观察能力 ;实验结果的分析和判断;Quantitation analysis of TNF-α induced apoptosis and necrosis by FCM;实验结果的分析和判断;两型TNF体外杀瘤率;结果判断中常见的逻辑错误 ; 预先激活TM-TNF-?反向信号对 NK92细胞杀伤的影响 ;TNFR封闭肽对佐剂性关节炎腹腔巨噬细胞IL-1b mRNA的影响;野生型和C-28F突变型TM-TNF-a反向信号对I-kB降解的影响 ; ;Fig 4 Death mode switched from apoptosis to necrosis by memTNF-a mutant Y87F ;NF-kB activation of Raji cell decreased after lipid rafts disruption ;mTNF expression vector were transfected to Hela cell, and then use this cell as effect cell to kill human EVC-304 cell. Hela+TNFwt was transfected with wild type mTNF, Hela+TNF(-47) was transfected with mTNF mutated on -47 which deleted the palmitoylated site.;前后结果内在联系提示什么？ ;mTNF expression increased after MCD treatment. ;TNFR1—— ;TNFR2抗体检测;科研项目的策划与实施;机遇在新发现中的作用;Louis Pasteur