疟原虫的镜检技术演示课件.ppt

疟原虫的RDT检测及镜检技术;疟疾的实验室诊断;疟原虫抗原检测;血膜的制作（取血操作）;取血部位和血量;血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄血膜；一种是血液涂成圆盘，称厚血膜。无特殊要求的可厚薄血膜分载玻片涂制。;血膜的制作（涂片操作）;薄血膜的制作;熟练工作者的推片姿势;厚血膜的制作;标准的疟疾厚薄血膜位置;各种不同的疟疾血片涂制法：;血膜的制作;染液的种类;染液的种类及染色原理;姬氏染液母液配置方法;姬氏染液的染色方法;操作1 （快染） 配制5%染液，（每张血片约需染液2ml）：量筒内量2ml缓冲液或新鲜凉开水，直接滴加吉氏原液7滴，混匀，滴入待染标本的厚薄血膜上，染色10min，清水细缓冲洗，晾干镜检。（一般配制5%-10%，染色时间短，一定掌握好时间。） 操作2 (慢染)配制3%染液：在染色量筒内量2ml蒸馏水或新鲜凉开水， 再滴加吉氏原液4滴，混匀，滴入待染标本上，染色30~40min。清水细缓冲洗，晾干镜检。（一般配制2.5%-3%染液，染色效果稳定。） ;血片制作与染色注意事项 ;1.在学习镜检疟原虫之前，必须先对正常厚薄血膜中各种血细胞的形态、内部结构和染色性质加以识别。 2.镜检疟原虫，首先学看薄血膜，在基本上掌握薄血膜中疟原虫形态后，再学习镜检厚血膜。 3.镜检疟原虫一般只查厚血膜，薄血膜仅作为原虫分类时参考和血片编号之用。 4.镜检疟原虫须用油镜头配合5X低倍目镜镜检，当发现疑难问题时再调换10X目镜进行观察。 5.检查时应从厚血膜的上缘开始，使血膜从上而下，自左至右（或由右至左），一行接一行，一个视野稍叠一个视野顺序地查完整个血膜。 一般情况下，厚血膜四周（稍薄些）疟原虫数量较多，且形态较清楚，镜检时不要忽略。每张厚血膜检查时间最少不低于20分钟。;薄血膜中常见的血液成分;薄血膜疟原虫形态;;薄血膜疟原虫形态;薄血膜疟原虫形态;恶性疟原虫--环状体;薄血膜间日疟大滋养体形态;间 日 疟 大 滋 养 体; 间日疟大滋养体;恶性疟大滋养体;恶性疟大滋养体;红细胞：胀大，褪色，可有薛氏小点。 胞浆：较不规则，空泡小或消失，浅蓝色?? 核： 红色，分裂为二个以上。 色素：黄褐色，分布不均匀。;薄血膜疟原虫形态;恶性疟未成熟裂殖体;间日疟成熟裂殖体;间日疟裂殖体;恶性疟成熟裂殖体;恶性疟成熟裂殖体 ;薄血膜间日疟雌（大）配子体形态;间日疟原虫雌配子体;间日疟雄（小）配子体形态;间日疟原虫雄配子体;恶性疟雌（大）配子体形态;薄血膜恶性疟雄（小）配子体形态;将（未）成熟雌配子体与成熟大滋养体(核分裂前，刚要进入裂殖体前期)的形态鉴别; 看完血片后，若为阳性，应立即按血片编号登记原虫的种、期，以防差错。为检查后记录结果方便起见，对疟原虫的种、期可使用英文字母缩写作为代号： 间日疟： P．v (Plasmodium vivax) 恶性疟： P．f (P．falciparum) 三日疟： P．m (P．malarae) 卵形疟： P．o (P．ovale) 环状体： R (Ring form) 大滋养体：T (trophozoite) 裂殖体： S (Schizont) 配子体： G (Gametocyte);如何确定疟原虫血片为阴性