13.固相膜免疫技术PPT.ppt

第十二章　固 相 膜 免 疫 测 定;一、固相免疫测定;二、固相膜的特点;三、常用的固相膜;;;五、固相微孔膜测定种类;六、膜固相免疫测定的特点; 第二节 免 疫 金 标 记 技 术 (Immunogold Labelling Techique);一、概述;二、胶体金基本知识;2.四种粒径胶体金的制备及特性;方 法 金颗粒直径 白 磷 法 5~12nm 抗坏血酸法 8~13nm 枸橼酸钠法 16~95nm 柠檬酸钠法 16~147nm 乙醇-超声波法 6~10nm 硼酸钠法 2~5nm 鞣酸-枸橼酸钠法 15nm;胶体金（Colloidal Gold）15~60 nm;三、免疫金的特性和制备 ;胶体金结合物（Conjugate）;四、免疫金（银）染色（Immunogoldsilver Staining，IGSS ）;银离子的还原剂：对苯二酚 胶体金及银原子起催化作用;免疫金（银）染色应用;五、金免疫测定 ;1.斑点金免疫渗滤试验（DIGFA）;DIGFA原理图;;技术类型;技术要点;2.胶体金免疫层析试验;;胶体金免疫层析试验;;ICA——间接法测抗体;;IFA与ICA的比较;;GIFA技术的发展（间接法测抗体）; ICA技术的发展;IFA 肌红蛋白 双孔法 S：测定孔 C：定量质控 100μg/L ; 金免疫测定方法特点; 金免疫测定方法评价; 金免疫测定应用; 金免疫测定应用; 金免疫测定应用; 金免疫测定的重点和展望; 金免疫测定今后的发展; 金免疫测定今后的发展;第三节; 一、斑点酶免疫吸附试验  ——Dot-ELISA;二、酶联免疫斑点试验 —— ELISPOT; ELISPOT 检测原理;;ELISAPOT;ELISPOT结果判断; 三、免疫印迹法 ——Western blot; 免疫印迹法; 操作步骤; 应用举例用免疫印迹法检查患者血清中的HIV病毒抗体;凝胶;;4.加入标记抗人Ig;;;方法评价