2011-4微生物标本采集技术(临床环镜空气)PPT.ppt

粪便标本采集 自然排便后，取有脓血、粘液、组织碎片部分 粪便1～3g。 液体粪便则取絮状物，一般取1～3ml，直接装入粪便容器或保存液或运送培养基中送检。 直肠拭子法 将肛门周围洗净，然后用一根浸过无菌生理盐水的棉拭子，插入肛门约５mm-2cm处，轻轻旋转，使之与直肠黏膜表面接触，然后取出置于无菌试管中立刻送至微生物室．本法只适用于排便困难患者或婴幼儿，不推荐使用拭子做常规性病原菌培养。 环境采样 有关采样 ?采样方法：采样是决定结果的第一要素！ ?采样时间：查问题时以提高检出率为原则。 ?培养基：质量问题影响检出率！关注！ ?检测条件：注意实验室污染。 ?培养条件：注意培养温度、培养时间。 ?结果报告：不能零报，报方法最小检出单位。 ?应该让懂院感知识的检验人员来采样会更好！ ?阳性检出率越高说明检测水平越高 美国的理念 1970年以前，美国的医院定期对空气和环境表面（如，地面、墙壁、台面）进行培养 。到了 1970年，CDC 和美国医院协会（AHA）主张停止对环境的常规培养，因为医院感染发生率与空气或环境表面中总的微生物污染水平不相关，且环境表面或空气中微生物含量的允许水平也没有有意义的标准 。1970-1975 年，美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作——一个已经持续的趋势 。 什么情况下要求进行环境采样 四种状况下要求进行环境采样一是当环境中的宿主或媒介物被认为在疾病传播中有流行病学意义时，提供疾病或感染暴发的依据 。第二种情况是在研究过程中进行适当的环境采样。第三种情况是为了监测潜在的危险环境条件，确认有害的化学或生物因素的存在，并验证危险因素的成功消除。第四种情况是为了质量保证（QA）而采样，以评估改变感染控制措施取得的效果或是确保设施或系统按照规范和预期结果执行。 物体表面采样 物体表面细菌总数的检测是评价 被污染程度 消毒效果 主要依据 物体表面采样--涂抹法 涂抹法：将5 cm×5 cm的标准灭菌规格板， 放在被检测物品表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子在规格板内来回均匀涂抹整个方格，并随之转动棉拭子，剪去手接触部分后，将棉拭子放入盛有10 ml生理盐水的试管中，充分振摇1min，作适量稀释后，接种于普通营养琼脂平板上进行计数，然后根据平板上菌落数得出物品表面每平方厘米的细菌数 物体表面采样--斑贴法 斑贴法:按无菌操作方法将5 cm×5 cm的无菌滤纸用灭菌生理盐水浸湿，均匀贴附于物体表面，1 min取下放人盛有25 ml灭菌生理盐水试管中，充分振摇1 min，作适量稀释后，接种于普通营养琼脂平板上作菌落计数，同样得出物品表面每平方厘米的细菌数。 压印法 压印法 在检验时，只需在现场打开皿盖，将略突出于培养皿口平面的培养基轻轻往被检物品表面一按，盖上皿盖，在培养箱内培养一定时间后计菌落数。此数值即为10cm2被检物品表面上的细菌数，无需任何换算即可同消毒标准和公共场所卫生标准加以比较。十分快捷、方便，甚至没有无菌室和专门检验人员也可顺利完成操作。是目前最理想的用于公共场所物品表面细菌污染程度监测的方法。 不规则物品如何采样? 消毒物品表面的监测： 1、采样时间：消毒处理后4小时内进行采样。 2．采样面积：被采面积＜100cm2 ，取全部表 面；≥100 cm2，取100cm2 。 3、采样方法： 用5CM*5CM的标准灭菌规格板放在被检消毒物品表面，用含相应中和剂无菌洗脱液（5ML）的棉试子在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子投入无菌洗脱液中，立即送检。 小型物体表面的结果计算用cfu/件表示。  1 、采样时间: 在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。 2 、采样面积及方法（棉拭方法） 被检人五指并拢，用含相应中和剂无菌洗脱液（5ML）的棉试子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次，并随之转动采样棉拭子，剪去手接触部位，将棉拭子投入无菌洗脱液中，立即送检。每只手面积按照30CM2计算。 手消毒效果监测 三、洗脱法 该法较其它两种方法采菌量多，但操作较复杂。 取灭菌生理盐水200ml～300ml，倒入适当的灭菌容器内，将待检查的手浸入生理盐水中，反复冲洗1min～2min。然后将冲洗后的水用细菌过滤器过滤，过滤完毕，将滤膜贴于普通琼脂培养基上，37℃培养24h，计算菌落数。 皮肤粘膜采样方法 用5cm×5crn灭菌现格板，放在被检皮肤处；用没有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投人10ml含相应中和剂的无菌洗脱