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多巴胺对大鼠心肌不同缺血时间再灌注热休克蛋白表达影响的实验性研究
中国医科大学研究生学位论文独创性声明
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取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论
文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或
其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研
究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意.
申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任.
论文作者签名:弛垂 甘期:兰!篮§臼±旦
中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书
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指导教师签名:
多巴胺对大鼠心肌不同缺血时间再灌注热
休克蛋白表达影响的实验性研究
前 言
急性缺血再灌注损伤是目前应用静脉溶栓和冠状动脉球囊扩张支架手
术治疗急性心肌梗死后发生的一系列病理生理过翟,是近年来国内外学者
一直在探求鹪决的问题之一。大量研究表明热休克蛋白的表达在心肌缺血
再灌注过程中与缺血时间存在明显的相关性,并且具有一定的保护作用,是
对抗缺血再灌注损伤的重要物质。因而,如何在缺血再灌注过程中增加热
休克蛋白的表达已成为国内外学者较为关注的热门问题。多巴胺作为治疗
心肌梗死的常用药物已经得到广泛的应用,扩张冠状动脉,增加心输出量,
对抗缺血再灌注损伤,具有一定的心肌保护作用。本实验拟探讨在缺血再
灌注过程中不同缺血时间与热休克蛋白表达之间存在的相关性,以及多巴
胺在此过程中对热休克蛋白表达的影响。
实验材料和方法
1动物和材料:中国医科大学动物部提供的成年Wistar大鼠48只。盐
酸多巴胺注射液(上海禾丰制药有限公司)。HSP,o抗体(小鼠单克隆IgG,
CRUZ公司)。
购于美国SANTA
2方法:20%乌拉坦腹腔注射麻醉大鼠,固定,分离颈静脉和气管,颈静
脉穿刺,气管切开,播管并固定。沿左侧胸骨旁线开胸,描记肢导心电图;连
接小动物呼吸机,剪开心包,将心脏挤出胸腔,在左心耳下方连同心大静脉
一并结扎左冠状动脉前降支,结扎后迅速将心脏送回胸腔,闭合胸腔,根据
分组在不同的时间点恢复心肌血液供应,同时经颈静脉插管输液(对照组
给予生理盐水,实验组给予多巴胺注射液5ug/m击.kg)再灌注5小时。灌
注结束后立即取出心脏,冲净血液,剪取心肌组织作为标本,-700C冰箱保
·1·
存o
3实验分组:将48只大鼠随机分为12组,每组4只。第一组:实验过程
中不结扎冠状动脉,再灌注时给予生理盐水。第二一六组:结扎冠状动脉
15分钟,30分钟,45分钟,60分钟和90分钟,再灌注给予生理盐水。第七
组:实验过程中不结扎冠状动脉,再灌注时给予多巴胺注射液。第八一十二
组:结扎冠状动脉15分钟,30分钟,45分钟,60分钟和90分钟,再灌注给予
多巴胺注射液。
4Western
blot测量标本心肌组织的HSP70含量。
5测量结果的灰度值。
6统计分析。
结 果
Western
blot显示缺血30分钟以内,HSP7。随时间的延长表达增加,30
分钟以后随时间的延长而逐渐减少。再灌注给予多巴胺注射液组与给予生
vs38.67±4.68
理盐水组灰度值比较(45.83±5.83
有明显的增加。缺血0分
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