多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus+polymyxa）CpS316抗菌物质的提取、体外抑菌试验及毒性研究.pdf

摘要 多粘类芽孢杆菌(Paenibacil[us po[ymyxa)Cp．s316是本实验室从泰山 土壤分离获得的一株拮抗细菌。前期研究结果表明，浚菌株抗菌谱广，菌 株发酵性状优异，发酵液性质稳定，显示了诱人的开发前景。本文进行了 Cp—S316抗菌物质的提取，体外抑菌试验及其毒性等研究，主要内容如下： 1．通过吸附与解吸附试验，研究了7种阳离子交换树脂和4种阴离子 交换树脂对Cp--$316抗菌物质的交换性能，筛选出一种对该抗菌物质吸 附和解吸效果较好的树脂。研究了该树脂对Cp一316抗菌物质吸附量、 最佳解吸剂、静态解吸曲线和动态解吸曲线。主要结果如下：大孔弱酸性 阳离子交换树脂D151对抗菌物质具有较好的吸附性能和解吸性能。静态 条件下l OOmL发酵液吸附率可达87．33％；0．6mol／L的HCI g树脂处理l 和0．5mol／L H2S04都可以较好的将抗菌物质解吸，并最终确定O，6mol／L 的HCI为最佳解吸剂，陔解吸剂对抗菌物质的静态解吸率为58．04％(树 脂：解吸剂=1：6(g／mL))；动念条件下解吸率为92．24％，其中抗菌物质较 为集中的解吸液(树脂：解吸液=1：4．3(g／mL))的解吸率为83．75％。另外，通 过试验建立了该抗菌物质的活性检测方法，进行了发酵液预处理条件的研 究，结果表明草酸最适含量为0．4％ 2．采用试管二倍稀释法，研究了cp—s316抗菌物质对大肠杆菌、产 气杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡巴氏杆菌和金黄葡萄球菌 6种动物病原细菌的MIC和MBC，测定了大肠杆菌、产气杆菌、鼠伤寒 沙门氏菌和金黄葡萄球菌的杀菌曲线，研究了培养条件对药物抗菌活性的 影响。主要结果如下：Cp--S316抗菌物质对大肠杆菌、产气肠杆菌、鼠 伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、鸡巴氏孝T菌的MIC分别为12．5”g／mL、 12 599／mL、6 和24h将10’CFU／mL浓度的大肠杆菌、产气杆菌、鼠伤寒沙门氏菌杀死， 对金黄葡萄球菌只有抑菌作用而无杀菌作用：不同的培养基DH和M92+ 浓度，对MIC的影响不明显，病原细菌的接种量对MIC影响比较明显。 3．小鼠急性毒性和蓄积毒性试验表明，该抗菌物质的半数致死剂量 fLD50)59／Kg(体重)，属于实际无毒：蓄积系数K5，属于弱蓄积。 关键词：多粘类芽孢杆菌Cp—s316；抗菌物质；提取：体外抑菌试验；毒 性试验 Testinvitroand of Extraction，Antibacterial Activity Toxicity AntibacterialSubstancefrom PaenibaciiluspolymyxaCp一$316 ABS。IJiAC。l‘ Paenibacillus 16wasantibioticbacteria polymyxaCp—S3 isolatedfrom soilsinMountainTai．Theresultsof showedthatithadseveral previousstudy featuressuchasbroadantibiotic fermentcharacteristics good spectrum，good and ferment thereforeit all US attractive yield，and gave properties，stable