畜禽蛋中抗生素高效液相色谱测定方法研讨.pdf

首届中国中西部地区色谱学术交流会 2006年8月 畜禽蛋中抗生素高效液相色谱测定方法研究 段辉， 陆磊，顾敏，徐艳 (甘肃省分析测试中心兰州730000) 蕾要：建立了分离和测定抗生素对照品的高效藏相色谱方法，并对分离的色谱峰膏集、浓缩。进行质谱分析，傲纯度鉴定．并对对照品 稀滓最在30d内光谱追踪及含量测试，测定箕稳定性及含量变化，提供最佳分析测试时闻，该方珐准确．可靠，土霉素，盐酸四环素、盐酸 2．2“。加标平均回收率分别为96．O冀．91．0％．89．1％符合方法学要求． 关键词：分蠢； 测定； 抗生素； 高效液相色谱； 土零素； 盐酸四环素： 盐酸金零素 1实验部分 1．1试剂 p 1．1．1乙腈：色谱纯(天津奥恩特试剂公司)，用前经O．45m微孔滤膜过滤 Il 1．1．2所有试验用水均为二次蒸馏水，使用前用0．45m的微孔滤膜过滤 1．1．3邻酸二氢钠优级纯(天津市科密欧化学试剂有限公司)： 容1L(B液)，去625mLA液和1000mLB液混匀，调节pH4．0 Ilm微孔滤 膜。 1．1．4盐酸金霉素：95．3％130489·200202(化学对照品)(中国药品生物制品检定所) 1．1．5土霉素：88．2％130487-200302(化学对照品X中国药品生物制品检定所) 1．1．6盐酸四环素：97．5％130488-200403(化学对照品)(中国药品生物制品检定所) 1．2仪器及分析条件 ． 1．2．1仪器：吉尔森高效液相色谱仪、半制备型、两元泵、紫外可见波长检测器、色谱数据处理工作 DaltonicAPEX 站：Bruker 1I傅立叶变换离子回旋共振质谱：日立330紫外可见分光光度计；超 声波处理器；3mL 60rag固相萃取小柱。 id 1．2．2色谱、质谱条件：250X4．6mm 流动相：(A)乙腈， (B)N砒P04(pIl2．5)水；梯度条件：(O5)min min u A：B=40％：60％，(12．01～15)rainA：B=23％：77％，峰宽0．5，峰灵敏度O．02：进样量20L； ESI源，正离子检测，喷雾电压4kV，毛细管电压4．5kV，离子源温度100℃． 1．3对照标准品配制 金霉素、盐酸四环素分别为10|lg／mL：10lIg／mL：20u g／mL 作者简介：段辉【】965一)．女．瑚南宜昌人．高级工程师，主要从事食品安全及环境检测工作 275 首届中圆中西部地区色谱学术交流会 2006Jr-8月 1．4实验材料的准备 实验测定用的鸡脯肉、鸡蛋、牛肉均购自兰州华联超市，鸡脯肉为冰鲜；鸡蛋、牛肉均为当 天上市，新鲜度良好。 · 1．5样品前处理 mL 离心10rain，缓缓滴加4m150％三氯乙酸溶液，边加边摇，再离心10min，上清液过滤，用29 缓冲液1份两次清洗残渣，超声震荡提取，离心，过滤，合并滤液。 分别用3mL甲醇、lOInL蒸馏水依次洗涤固相萃取小柱，将上述滤液分别通过小柱，流速保持 1