番鸭呼肠孤病毒活疫苗免疫途径及其效果研讨.pdf

鱼堕登壁壅堕堕翌煎茎 番鸭呼肠孤病毒活疫苗免疫途径及其效果研究’ 林锋强胡奇林。 陈少莺 陈仕龙朱小丽程晓霞欧阳岁东 (福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建，福州350003) [摘要]1日龄雏番鸭经肌内注射、口服、点眼和喷雾等途径免疫番鸭呼肠孤病毒活疫苗．7天后攻毒，结果表明：肌内免疫 显示：肌内免疫组淋巴细胞活性最高、口服免疫组次之、点眼组第3、喷雾组最差，与对照组无显著差异，与攻毒保护结果类似，证明： 番鸭呼肠孤病毒括疫苗以肌肉注射免疫效果最好，El服免疫也能提供有效保护，但点眼和喷雾途径不能提供有效保护；口服免疫有 望成为比肌内免疫更安全、方便、快捷的免疫途径。 [关键词]番鸭呼肠孤病毒}活疫苗{免疫途径 目前，大多数禽类传染病的免疫预防多采用非肠道注射方法。然而，随着养禽业的工业化生产，注射免疫具有 诸多不便和困难，如费时，费力，因而对免疫预防也提出了新的要求。要选择最佳免疫途径，尽量模拟病原体的自 然感染途径尤为重要。牯膜免疫途径由于接种方便、安全并可产生有效的免疫保护而倍受关注o]。近年来，粘膜免 疫(口服、气雾、滴鼻或点眼等)接种方法已广泛应用于生产实践口]。番鸭呼肠孤病毒病是国外番鸭的一种主要传 死率高，给番鸭业造成严重经济损失“’51，我们于2000年在国内外首次研制成番鸭呼肠孤病毒活疫苗用于预防该 病，取得满意结果“J，但粘膜免疫是否适用于番鸭呼肠孤病毒活疫苗的免疫预防，尚未开展研究。本试验旨在模拟 番鸭呼肠孤病毒自然感染的局部免疫，探讨番鸭呼腑孤病毒活疫苗的非注射途径免疫的可能性。 1材料和方法 1．1病毒及疫苗番鸭呼肠孤病毒强毒株MW9710株第10代番鸭胚成纤维细胞培养毒 (MW9710D3MlO)；番鸭呼肠孤病毒活疫苗，批号：0402，生产日期：040211，由本室保存和生产。 产品。 1．3试验动物1日龄雏番鸭，购自莆田克里莫种番鸭场。分为5组，分别为对照组、肌内注射、口服、点眼和喷雾免 疫组，每组13羽，免疫荆量均为0．2ml／羽，隔离饲养。 1．4指标观察 鸭的发病和死亡情况，计算发病率、死亡率和保护率，确定番鸭呼肠孤病毒活疫苗免疫最佳途径。保护率计算方 法： 保护率(％)；塑骂黧高产×100％ ConA，对照孔 4099／ml 胞悬液，苔盼蓝拒染计数，调整细胞浓度为1×107。试验孔每孔加50pl细胞悬液和50pl 束前3h，各孔加入10pllOmg／ral DMSO溶液 ☆本研究受福建省科技厅项目资助。 林悻强：男，1976年出生，硕士，主要从事免疫学研究 *：通讯作者 ——697 史垦蔓墼量堕堂垒壹壁堂壁垒璺±三壅堂查受煎盒堡塞塞 肠孤病毒活疫苗免疫最佳途径。 2结果 各组番鸭发病和死亡情况，结果见表l。如表1所示，对照组发病率为100％，死亡率为50％，表明番鸭对番鸭呼 肠孤病毒易感；肌注组攻毒后番鸭发病率和死亡率均为o，提供完全保护；口服组发病率为12．5％，保护率为87． 5％，可提供有效保护；而点眼和喷雾组的发病率和死亡率均接近对照组，不能提供有效保护。 哀1 不同途径MDRV活疫苗免疫后攻毒番鸭发病率和死亡率 2．2不同免疫途径免疫后番鸭淋巴细胞转化能力每组 5羽番鸭经不同途径接种疫苗后，隔离饲养、观察35 天，未见局部和全身不良反应，表明各种途径免疫均安 ■ⅢI注 ■‘1艘 全。于免疫后7、14、21、28、35天采血检测血液淋巴细胞 口点腿 刺激指数，结果如图l。