微生物样本采集的标准化与规范化PPT.ppt

微生物样本采集的标准化与规范化 基本原则（一） 采集标本前局部应做好准备工作，标本必须直接采自病变部位。 尽可能在合适的时间采集。 例如：清晨的痰和尿液含菌量较多，因此是采集的最佳时间。了解感染性疾病的自然过程有助于决定采集何种标本及采集时间。 必要的免疫学知识对解释血清学结果十分有用。 应尽量采集足量的标本送实验室。 例如：成人的血培养标本每次宜采集10ml以上。 基本原则（二） 使用合适器械及运送容器很重要，所有标本都应使用无菌容器；棉拭子常与运送培养基配合使用，但棉拭子不宜用作厌氧菌培养。任何送厌氧培养的标本应做到在厌氧环境下运送。 培养标本尽可能在应用抗菌药物前采集，解释培养结果时也应考虑抗菌药物使用史。有些细菌如淋病奈瑟球菌、化脓性链球菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟球菌等对抗菌药物非常敏感。 对送检标本有特殊要求时，应在化验单上清楚标明，或直接与实验室联系。 常见标本类型 血液、骨髓、脓液 痰、尿、便 胸水、腹水、脑脊液、胆汁、胰液 伤口：引流液、分泌物 病变组织：炎性组织、坏死组织、脓苔 特定部位穿刺液：胰腺周围、囊肿内部 中心静脉插管 体内留置各种引流管 0 30 60 Time (min) Temp 体温 Chills 寒战 Blood Cultures 血培养 BACTEREMIA LEVEL 菌血症的水平 采血套数 表皮葡萄球菌的临床意义 2－3套血培养，有助于污染的判断。 Tokars, JI. Clin Infect Dis 2004; 39:333 采集1套无法判断是病原菌还是污染菌。 厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶 采血量(ml)与检出率的关系 Overall 血培养物每增加一毫升，真性菌血症 成年人微生物的检出率增加3％ 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例为1：4－1：10 皮肤消毒剂： 推荐使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘伏。 碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏。 消毒剂需要有足够的作用时间以保证消毒效果（碘酊作用30s；碘伏作用1.5~2 min）。 洗必泰的作用时间和碘酊一样，但是没有过敏反应，因此不必擦去，但不能用于小于2个月的婴儿。 操作方法 以75%酒精消毒培养瓶胶塞，等待1分钟。消毒静脉穿刺部位：以碘酊拭子从穿刺中心开始向四周同心消毒，待干；以75%酒精脱碘；不要再接触穿刺部位；抽血8-10 毫升/次，注入培养瓶；直接在培养瓶上注明患者姓名、送检日期， 2小时内送检。 培养瓶消毒程序： 用75％酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消毒剂），作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面残余液体．然后注入血液。 需氧和厌氧血培养瓶 血培养标本采集流程 采集次数 急性脓毒血症 10分钟内从不同部位抽血2-3次； 急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血3次，每次相隔1-2小时； 亚急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血3次，每次相隔15分钟以上，如果24小时内培养为阴性，则同上再抽血培养3次。 不明原因发热 从不同部位抽血2-3次，每次相隔1小时以上；如果24小时内培养为阴性，则同上再抽血培养2-3次。 2.呼吸道标本 下呼吸道标本 1）支气管肺泡灌洗液，支气管刷或液，气管吸出物（可避免正常菌群污染，应首选）：将吸出物或洗液置入“U”形管中；将支气管刷置入有盐水的无菌容器中。标本量1毫升。≤2小时，室温，1次/天。 2）咯出痰 在护士或医师的指导下收集痰标本；让患者用水漱口以去除口腔粘膜表面的正常菌群；指导患者深咯，收集下呼吸道痰(不要鼻后液体)。留入无菌容器。≤2小时，室温，1次/天。 乳酪样痰、粘液痰、 鲜血痰、 唾液 血痰 3）诱导痰 嘱患者刷牙(主要是牙龈和舌头)后用水漱口；使用喷雾器，让患者吸入3-10%的无菌盐水25毫升；将诱导出的痰液收集入洁净或无菌容器中。其它同前。 标本要求 最理想的标本为：≤10个鳞状细胞 / 100倍视野，≥25个多核白细胞。 标本最小量：细菌，1毫升；真菌，3-5毫升；分枝杆菌，5-10毫升。 鳞状上皮细胞 革兰染色 ×200 白细胞 革兰染色 ×200 结核杆菌检查标本留取 浓缩集菌法查抗酸杆菌：可嘱患者咯晨痰1-2口或更多于洁净干燥容器中。 结核菌培养：应停患者当晚抗结核药物一次，次晨咳痰1-2口送检。 上呼吸道： 1）口腔：用拭子去除损伤表面的分泌物或碎屑，弃去拭子；用另一拭子用力抹取损伤部位，不要接触正常组织。用拭子肉汤培养基运送，≤2小时，室温，1次/天，不鼓励采集表层组织标本检测细菌，应选用供