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荧光PCR检测原理
荧光PCR检测原理;一、荧光信号的检测; 荧光标记信号的产生 荧光标记基团在某波长的激发光刺激下,
产生一个更长波长的发射光; FRET? 某荧光标记基团在激发光刺激下生成某波长的发射光,当另一屏蔽基团与其距离合适时,原发射光将会被屏蔽基团所吸收,并转化为其他波长的发射光或热能,称之为FRET。;荧光信号;Taqman;二、典型的荧光PCR扩增曲线;Bio-rad iCycler扩增曲线;PE-5700扩增曲线;PE-7700扩增曲线;Roche LightCycler扩增曲线;三、Ct值
样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数;四、荧光PCR定量的原理
;Unknown;五、荧光PCR区别于其他PCR方法
主要有以下优点
1) 全封闭反应,无需PCR后处理
2) 特异性强,灵敏度高
3) 采用对数期分析,摒弃终点数据,定量准确
4) 定量范围宽,可达到10个数量级
5) 仪器在线式实时监测,结果直观,避免人为判断
6) 可实现??管双检或多检
7) 操作安全,缩短时间,提高效率
8) 利于自动化和联网管理
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