荧光PCR检测原理2.ppt

荧光PCR检测原理;荧光PCR？ ;荧 光 染 料; 荧光标记信号的产生 荧光标记基团在某波长的激发光刺激下， 产生一个更长波长的发射光;荧光信号;SYBR GREEN I;Molecular beacon？;荧光标记杂交双探针;CT值—样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数;对数期分析与终点分析的比较;荧光PCR重现性;标准曲线→定量;荧光PCR特点 灵敏度高 特异性强 全封闭PCR过程，无需后处理 采用dUTP—UNG酶的防污染系统，有效降低污染机会 即时反映扩增过程，摒弃终点数据，更适用于定量 定量范围宽，可达到10个数量级，无须稀释样品 可实现一管多检 仪器自动分析，更快获得结果;PCR荧光 双检多检试剂;荧光双检多检检测试剂;竞争性荧光内标(IC) 定量PCR技术;竞争性荧光内标(IC);内标工作原理图;荧光定量PCR的临床应用;疾病的早期诊断;病毒感染窗口期的NAT检测;病情评估和预后判断;对病毒感染的药物???疗中，免疫学指标的变化通常比较滞后出现，且受个体差异影响较大，从而对临床判断难以及时提供直接证据；而荧光定量PCR检测可直接反映病原体滴度是否受药物治疗发生变化，从而为药物疗效观察提供直接依据，以供治疗方案参考。同时对不同治疗时间的用药剂量和用药时间提供依据。;ALT;CHRONIC HEPATITIS B ; 不同剂量IFN-a 单次给药后HCV-1型病人 病毒滴度变化的定量监测（N=32）;新药验证;拉米夫定抑制血清HBV DHA;遗传疾病的早期诊断;突变检测原理;突变检测原理;Factor V 点突变检测;;;母婴传播的监控;肿瘤的诊断;荧光PCR在血液筛查中的应用;NAT(Nucleic Acid Amplification Testing);急性感染时期HIV的标志物;急性感染时期HCV的标志物;急性感染时期HBV的标志物;病毒颗粒;多样本混合（Mini pool）;递减法;;成本分析;仪器设备要求 年采血量15吨~20吨： 核酸纯化系统 ×1 多通道荧光PCR自动检测系统 ×2 高速低温离心系统 ×1 Pooling Machine ×1