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摘 要
高效的愈伤组织再生培养体系是利用生物技术开展水稻育种_I_作的前
提和丛础。本研究选择了16个水稻品种为研究对象,对这些品种的组织培
养特性进行了系统的实验探讨。这些品种包括粳稻品种两个,即水稻离体
培养的模式.P种台北309和特早熟uu种石狩白茅,爪吐稻 l个,Ulf品种
13个,即高产品种华航1、华航3,粳釉89和粳釉93、优质品种水晶占、
溪野占、湖南丝苗、特Till占、台湾香占和奇妙香、特色.P种五山乌糯、L,
西陆稻、和离体培养特性好的参照品种秋包3。对于这些在生产实际中有一较
大利用价值的水稻品种,有必要了解和研究它们的组织培养特性,为进一
步利用生物技术育种提供参考并打下基础
对于水稻的组织培养,通常的培养程序包括愈伤组织的诱导、增殖和
植株再生三个步骤,但近些年来必威体育精装版的研究表明,在植株再生培养之前对
愈伤组织进行脱水处理和分化预备培养能够显著改善愈伤组织的植株再分
化能力。本文比较与分析了这些不同基因型品种在愈伤组织诱导、愈伤组
织增殖培养和愈伤组织植株再分化中的差异,探讨了2,4-D,BA,铜离子
脱水处理以及预备分化处理等外界因素的影响作用。
对这16个品种进行愈伤组织的诱导培养,发现在添加了2mg/L2,4-D
的处理内,台北309和水晶占的愈伤组织质量表现最为突出;在同时加入
了2mg/L的2,4-D和。5mg/L的BA的处理中,特釉占、奇妙香和五山鸟糯
的愈伤组织状态较好。BA对于不同水稻品种愈伤诱导的作用各异:特釉,’.
和爪哇稻会因为BA的加入而显著提高了愈伤组织的诱导率,而粳釉89,
粳釉 93,溪野占、湖南丝苗、台湾香占、奇妙香这些品种则显著降低其愈
伤组织的诱导率。在愈伤组织状态方面,加入BA后华航3,粳釉93,湖南
丝苗和台湾香占的愈伤质量下降明显 与之相反,特釉占、五山鸟糯、石
狩自茅和爪01?稻的愈伤组织质w都有了较大的提升
在愈伤组织的增殖培养中,不同水稻品种间在愈伤组织的增殖率力而
存在着统计学意义上的极显著差异。在2.4-D2m留L的处理中,秋包3的
增殖率是最高的,而台湾香月}.、湖南fYt37.五山鸟糯等的增殖率较低。丫!
同时加入2mg/L的2,4-D和。.5mg/L的BA的处理中,粳釉89的增殖倍数
最高,而水晶占、五山乌糯的增殖倍数较低。因为队的加入而显著提高其
增殖效率的品种有华航I、华航3,粳釉89,粳釉93、秋包3,湖南丝苗和
台湾香占。而水品占则相反,加入BA后增殖效率显著下降。
以台北309为考察对象确定了失水率30-40%能获得最好的植株再生
效果,将这一结果作为其他品种进行干燥失水处理时的依据。
在愈伤组织的再生培养中,水稻品种台北309、秋包3和华航3在没有
添加任何激素的条件下都能够长出再生执株,原因可能是这些品种的内源
激素含量比较高,或者是在增殖过程中其愈伤组织已经有体细胞胚的形成。
在加入了2m眺 的BA的处理内,除了华航I和华航3再生植株的数量增
加不显著外,其它所有试验品种再生植株数量都显著提高,这说明BA对于
水稻植株的再生有着显著的促进作用。在同时加入2mg/L的BA和3mg/L
的五水硫酸铜的处理内,铜离子的作用效应差异较大,华航 1、水晶占和台
湾香占的再生植株数量显著提高,而巴西陆稻和五山乌糯再生植株数量显
著下降。
预分化处理培养基中将BA的含量提高了3倍,并且加入了3m叭 的
ABA抑制愈伤组织的生长,改善愈伤组织的状态。顶分化处理后将这些愈
伤组织进一步分化培养,结果发现除了台北309和秋包3增长不明显外,
大部分品种的植株再生数量和质量都得到了明显的提高和改善。这说明预
分化处理的作用能普遍提高植株的再生培养效果。
关键词:水稻;愈伤组织培养:植株再生:激素:铜元素
1前言
水稻是世界上最为重要的粮食作物之一,是全世界 40%人口的主要食
物来源 (王力等,1999)。如何提高水稻产量和改善水稻的品质一直是全世
界所关注和研究的重要课题。在20世纪里,水稻育种经历了矮化育种和杂
种优势利用两次革命性的变化,大大提高了世界水稻的产量。
从20世纪70年代开始,随着分户生物学研究的不断深入和发展,植
物基因土程作为一项新的技术开始兴起。它能够将大然或人工构建的外源
基因导入受体细胞基因组中去,从而为快速有效地改良物种提供了一条切
实可行的全新途径。自从1984年首次获得转基因烟草以来,基因工程技术
在近些年来已经得到了飞速的发展,许多物种都已经成
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