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微生物快速检测技术及应用.ppt
ET003 金黄色葡萄球菌测试片 培养条件:36±1℃/24-30h 菌落颜色:菌落中心黑色,周围有蓝绿色晕圈 S.aureus 培养条件:36±1℃/24±1h 大肠菌群:蓝绿色+紫色 大肠杆菌:紫色 ET004 大肠杆菌/大肠菌群测试片 培养条件:26±1℃/48±2h 菌落颜色:红色,偶见暗红色、橙色和黑色等其他颜色。 注:由于霉菌酵母菌多具有产色素能力, 所以菌落受色素影响而呈现多种颜色。 ET005 酵母菌/霉菌测试片 Yeast/Mold 培养条件:36±1℃/24±1h 沙门氏菌:蓝绿色 大肠菌群:靛蓝或蓝紫色 ET006 沙门氏菌测试片 Salmonella Easy TestTM 快速测试片产品列表 产品编码 名 称 规 格 ET001 菌落总数测试片Aerobic Count 25片/包 ET002 大肠菌群测试片Coliform 25片/包 ET003 金黄色葡萄球菌测试片Staph.aureus 25片/包 ET004 大肠杆菌/大肠菌群测试片E.coli/Coliform 25片/包 ET005 酵母菌/霉菌测试片Yeast and Mold 25片/包 ET006 沙门氏菌测试片Salmonella 25片/包 微生物快速检测系列产品(三) ESM系列显色培养基 显色培养基的原理 显色/荧光培养基是一类微生物生长培养基,含有与色原体(颜色反应)或荧光基团(光反应)相连接的酶底物。 目标微生物自身代谢产生的种属特异性酶与相应酶底物反应,释放发色基团使培养物显色,或者释放荧光基团在紫外波长下使培养物显现荧光。 酶底物是种属特异性的,通过调整培养体系可以进一步提高培养基的选择性,某些情况下目标微生物不需要进一步的确证试验。 显色培养基技术简介 仅18-24h就可得到初步检验结果。 显色明显易于观察,菌落外观易于辨认。 优 点 酶与底物显色反应特异性强,降低假阳性率。 可有效缩短检测时间 降低对检测人员技术水平要求 减少后期鉴定工作量 沙门氏菌、单增李斯特氏菌、阪崎肠杆菌、O157、副溶血性弧菌、志贺氏菌 标准 其他 金黄色葡萄球菌、大肠菌群、大肠杆菌 常见检测项目 前增菌/选择性增菌 选择性分离 生化或/及血清学鉴定 报 告 ——致病菌检测流程 在传统培养基上与沙门特征相近的菌很多。向客户推荐使用显色培养基代替HE、XLD,可以大大减少后期生化鉴定的工作量。 1 沙门氏菌检测 显色培养基在检测中的应用 沙门氏菌显色培养基 沙门氏菌:紫红色菌落 大肠杆菌:蓝绿色菌落 奇异变形杆菌:无色菌落 弗氏志贺氏菌:无色菌落 金黄色葡萄球菌:抑制 培养条件:36±1℃/18-24h LB1増菌 LB2増菌 PALCAM和显色 结果 生化鉴定 在PALCAM等传统培养基上,无法将单增李斯特与李斯特菌属内的其他李斯特菌相区分; 李斯特菌显色培养基,可以直接鉴定到种,将单增筛选出来,且准确率高; 显色培养基在检测中的应用 2 单增李斯特氏菌检测 李斯特氏菌显色培养基 培养条件:36±1℃/18-24h 李斯特氏菌属:蓝绿色菌落 单增李斯特氏菌:蓝绿色菌落,周围有白色不透明晕圈 绵羊李斯特氏菌:同单增一样 金黄色葡萄球菌:黄色菌落 大肠杆菌:抑制 BPW增菌 改良LST肉汤 显色(DFI) 生化鉴定 国标 结果 无菌水 EE肉汤 显色 生化鉴定 结果 行标 显色培养基在检测中的应用 3 阪崎肠杆菌检测 DFI琼脂 阪崎肠杆菌显色培养基 相同点:阪崎肠杆菌均为蓝绿色菌落 不同点:配方不一致;所属标准不同 主要根据客户使用标准,选择用哪种产品 显色培养基在检测中的应用 4 大肠杆菌O157检测 大肠O15:H7:(浅)紫红色 大肠杆菌:铁蓝色 其他菌:抑制或呈无色、蓝绿色、铁蓝色 培养条件:36±1℃/18-24h 大肠O157显色培养基 APW増菌液 显色培养基或TCBS 生化鉴定 结果 副溶血性弧菌:紫红色 霍乱弧菌:蓝绿色 创伤弧菌:蓝绿色 显色培养基在检测中的应用 5 副溶血性弧菌检测 在传统培养基TCBS上拟态、创伤弧菌与副溶血性弧菌都是绿色菌落,不能区分 并且绿色菌落容易被大量黄色杂菌掩盖,造成漏检 培养条件:36±1℃/18-24h 弧菌显色培养基 显色培养基在检测中的应用 6 志贺氏菌检测 志贺氏菌显色培养基 原理 利用糖代谢和特异性酶,针对非志贺菌产生的生化反应,分离出不同颜色的非目标菌落。 目标菌 白色,菌落大小1-3mm,菌落周围为紫红色 非目标菌 黄色、蓝绿色等各种颜色 培养条件 36 ℃±1℃,20 h~24 h 蜡样芽孢杆菌: 蓝绿色菌落,菌落周围有白色晕圈。 7蜡样芽孢杆菌检验 显色培养基在检测中的应用 蜡样芽孢杆菌 ATCC1177
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