中药质量标准的建立与发展.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 黄连 2005版—薄层扫描—小檗碱不低于3.6% ， 2010版—高效液相色谱法一测多评—小檗碱、药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀可控成分达到10%， 整体上体现黄连有别于黄柏等的活性关系。 小檗碱在多种植物中均有大量分布，作为黄连唯一的指标，客观性和专属性较差。 （3）特征和指纹图谱技术 单一成分作为质量控制指标不符合中药质量控制的要求。 色谱指纹图谱 本质上是药典色谱技术在应用上的延伸 确能够反映中药内在质量的整体变化情况和质量的均一程度 控制产品批与批间的稳定切实可行。 2005版收载高效液相色谱特征图谱1项 2010版收载高效液相色谱特征图谱11项，指纹图谱11项 使整体性控制中药质量的方法学和实际应用方面有了大幅度的提高，确保中药质量的均一稳定。 有效性方面 HPLC 指纹图谱 HPLC 指纹图谱上的10 个峰均得到了明确的指认，指认的峰面积之和已占总峰面积的89%。 肿节风提取物 山楂叶提取物 05版质控指标为金丝桃苷，含量低约为0.5%。现修订为测定牡荆素鼠李糖苷，限度为8.8%，远高于金丝桃苷。探索建立了指纹图谱，指认了其中的主要峰。 牡荆素鼠李糖苷 牡荆素 金丝桃苷 牡荆素葡萄糖苷 注射用双黄连指纹图谱 相关性 不同批次测定结果 本版药典用于计算两个图谱相似程度的计算机软件为国家药典委员会发行的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》 安全性方面 1、重金属和有害元素 电感耦合等离子体质谱（ ICP-MS）测定中药中砷、汞、铅、镉、铜的含量。 新增枸杞子、山楂、人参、党参等用药时间长、儿童常用的品种 安全性方面 2. 黄曲霉毒素： 僵蚕、酸枣仁、桃仁、胖大海、陈皮 3. 有机溶剂残留： 工艺使用有机溶剂的均检查有机溶剂残留 4. 全面禁用苯作为溶剂，所有采用含苯的分析方法均重新修订 5. 川乌、草乌、马钱子等剧毒性加工饮片，采用HPLC等更先进、更精确的方法加以限量检查 （四）科学应用新技术 新版药典对于用常规分析方法解决不了的问题，积极采用新技术 液相色谱-质谱联用限量及定量技术 DNA分子鉴定技术 薄层-生物自显影技术（TLC-Bioautography） 1. 液相色谱-质谱联用限量及定量技术 千里光 国际上因其有肝肾毒性和胚胎毒性等而禁用。 国内多种中成药中含有千里光，致使出口骤停。 中国产千里光药材中adonifoline含量相对较低或几乎没有 该化合物结构上无生色团，常规方法无法测定 限度以WHO于1988年颁布了《IPCS环境卫生标准 80：吡咯里西啶类生物碱》和1989年颁布了《IPCS健康与安全指南第26号：吡咯里西啶类生物碱的健康和安全指南》PA的限量为依据 规定千里光不含adonifoline或含adonifoline不得超过0.004%。 2. DNA分子鉴定技术 首次用于中药标准中 新版药典对于蛇类药材物种鉴定采用了DNA分子鉴定技术 研究采用了试剂盒使操作时间大大缩短，精度提高 该方法的采用有力的遏制了困扰市场和监督多年的假冒伪品问题。 乌梢蛇PCR分子鉴定 10个不同批次的乌梢蛇药材PCR鉴别结果 1.阳性对照 2-11.乌梢蛇12.阴性对照 13.空白 乌梢蛇药材及其混淆品PCR鉴别结果 阳性对照 2.乌梢蛇3.虎斑颈槽蛇 4. 三索锦蛇5.双全白花蛇 6.灰鼠蛇7.滑鼠蛇 8.红点锦蛇 9.王锦蛇10.赤链华游蛇 11.中国水蛇 12.短吻蝮蛇 13.百花锦蛇 14.眼镜蛇 15.赤练蛇 16.铅色水蛇 17.金环蛇 18.山烙铁头蛇19.黑眉锦蛇 20. 环纹华游蛇21. 蕲蛇22.金钱白花蛇23.阴性对照 24.空白 乌梢蛇 酒乌梢蛇PCR分子鉴定 图 10个不同批次的乌梢蛇炮制品PCR鉴别结果 1.阳性对照； 2-11乌梢蛇；12.阴性对照 ；13.空白 3. 薄层-生物自显影技术（TLC-Bioautography） 和生物活性测定相结合 使薄层色谱分离得到的结果，除了鉴别真伪之外，还能知道其中哪些成分有生物活性。 新版药典在生地黄、熟地黄、紫苏梗等标准中应用。 A B 紫苏梗药材的薄层色谱图 A. 紫外光灯（365 nm）下检视；B. 浸以0.8 mg/ml的DPPH乙醇溶液，置可见光下检视 S. 迷迭香酸对照品;1.紫苏梗(zsg-070901); 2. 紫苏梗(zsg-070709); 3. 紫苏梗(zsg-tj-4); 4. 紫苏梗(zsg-tj-13); 5. 紫苏梗(zsg-tj-9-5); 6. 紫苏梗