2-农业细胞工程 PPT.ppt

3、融合细胞的选择培养 融合处理产物→ 未融合的原生质体：发育快，非所需。 同源融合的原生质体：发育快，非所需。 异源融合细胞：不易发育，所需。 设计选择体系→优先选择异源融合细胞 →淘汰其他形式的细胞。 1）色彩识别法 利用两种细胞色彩上的差异识别。 绿色原生质体 + 淡黄色原生质体 ↓ 异源融合细胞 （黄绿色） 五、人工种子的贮存与萌发 迄今尚未攻克的难关。 一般保存方法：低温（4～7℃）、干燥（相对湿度＜67%）。 胡萝卜，两个月，发芽率100％。 但这种贮存方式的费用昂贵。 自然条件：贮存时间较短，萌发率较低。 1990，柯善强，黄连，未消毒土壤，4.4％～5.2％。 人工种子状况评价 ▲研制尚处于实验室研究阶段 ▲产业化前景诱人 ▲各国巨额资金投入 第四节 单倍体技术 一、单倍体技术的含义 单倍体育种技术指在不经正常受精过程的情况下，由单倍体性细胞单独发育成完整的植株体，再经染色体加倍，获得基因型纯合、遗传性稳定的纯系的育种过程。 快速、高效的植物育种新途径。 二、单倍体技术的应用 1、新品种培育 我国单倍体育种技术居世界前列。 1）水稻：50多个，占世界的25%。 ▼1988，南农，籼稻原生质体，世界首次改造籼稻品质。 ▼ 中国农科院作物所，中花8号、9号、10号、花寒早等15个水稻新品种，推广面积1千多万亩。 ▼华中师范大学，籼稻蛋白质13.72%～14.81%，比世界水稻蛋白质含量约高近1倍。 ▼高千粒重杂交稻：60克，世界50克，“东方魔稻”。 2）小麦： “京花1号”、“京花3号”、“小偃107号”等6个良种，推广500万亩。 2、自交系选育 单倍体—杂种优势利用。 玉米：花培纯系100多个。 山东农大：山农3号、山农973、山农985，糯1号，泰爆2号等。 3、基因转移 染色体： 利用花粉植株选择代换系或附加系。 基因转移： 抗稻瘟病基因：中国农科院沈锦骅，2年，Pi一ZT基因，中花8号和9号品种。 4、突变体选择及其利用 单倍体无显隐性关系→变异易选择。 Schaeffer，水稻，高蛋白质或赖氨酸含量。 花培表型变异→遗传标记→遗传操作。 烟草、水稻、大麦以及珍珠粟等。 三、花药培养育种 基本程序： 小孢子→愈伤组织→再生株→染色体加倍→纯系→杂交种。 （秋水仙碱诱导染色体加倍） ★目前应用最广、效果最好的单倍体技术。 技术特点 ▲快速：一个有性世代可得到花培纯系， 1代=5-6代，缩短2-4年。 ▲诱导率低，基因型障碍大。山东农大↗ 花粉植株诱导率3-5%，山东农大：20-30%。 ▲推广品种：山农3号 1、选材 花药供体：典型健壮单株。 生育时期：雄穗顶端距叶片喇叭口约3-5cm。 2、镜检—单核中后期 3、预处理 所选雄穗7℃低温预处理7-14天。 4、花药接种与诱导培养 小孢子形成多细胞体 荧光下多细胞体 5、分化培养—多细胞体形成愈伤组织 花药愈伤组织 6、绿苗分化—单倍体苗 7、壮苗移栽 8、染色体加倍 加倍方法常用秋水仙素溶液处理。 幼苗期：0.1-0.5%秋水仙溶液滴心叶 加倍率约50% 愈伤组织阶段： 100-200ppm秋水仙素溶液浸泡6-12小时； 50ppm秋水仙素的分化培养基上培养2-3天。 加倍率60-80%。 双倍体植株 9、花培纯系的获得 10、杂交种选育 杂交种比较 品种育成--山农3号 第五节 细胞杂交技术 一、细胞杂交的概念 细胞杂交技术又称细胞融合，是指将不同来源的原生质体相融合并使之分化再生，形成新物种或新品种的技术。 细胞杂交：自然发生或人工诱导。 自然发生：精卵有性结合。 人工诱导：人工利用诱导剂使原生质体融合。 二、植物细胞杂交 甲原生质体 + 乙原生质体（人工分离） 融合细胞 离体培养、诱导分化 完整植株 植物细胞杂交/体细胞杂交 相关名词 准性杂交： 由体细胞原生质体融合实现的细胞杂交。 超性杂种： 体细胞杂交生成的杂交细胞。 异核体：