2014届高三生物一轮复习课件：无菌操作技术实践 苏教版选修1 PPT.ppt

第一章 无菌操作技术实践;一、微生物的培养 1.培养基 (1)概念：为人工培养微生物而制备的，提供适合微生物_______ ______或积累____________的营养基质。 (2)种类： ①按照物理状态可分为：_____培养基、半固体培养基和_____培养 基。 ②按化学成分可分为：___________、合成培养基和半合成培养基。 ③按功能可分为：基础培养基、___________、鉴别培养基等。;2.无菌操作与接种技术 ___________ (1)灭菌的方法 干热灭菌 ___________：如高压蒸汽灭菌法 (2)无菌操作与接种技术： ①无菌操作——微生物接种技术的关键： a.培养基、试管、培养皿、接种器械在接种前都需要_____。 b.操作人员及操作环境要求_______。;划线接种;3.培养基的配制 (1)配制原则：为所培养微生物的________________提供所需的 _______________。 (2)配制过程： 配制培养液→________→分装→包扎→灭菌__________ 。 【点拨】灭菌可杀死所有微生物，消毒只杀死微生物的营养细 胞，常用的消毒方法有70%的酒精消毒、紫外线消毒等。;【点拨】微生物计数培养时常设置对照实验：(1)判断培养基是否有杂菌污染，可将未接种的培养基同时进行培养；(2)判断选择培养基是否有筛选作用，可设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养。;种 类;2.涂抹平板法和混合平板法的异同 (1)过程如图：;(2)结果不同： ①涂抹平板法：细菌菌落通常仅在平板表面生长。 ②混合平板法：细菌菌落出现在平板表面及内部。 (3)目的相同：分离各种目的微生物。;3.常见的消毒和灭菌方法;内容;【典例训练】(2011·新课标全国卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以____为惟一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于__________培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_________和_________。 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________。;(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_____和______。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_______附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 【解题指南】 1.考查实质：本题以筛选菌株为情境考查培养基的配制、接种方法、无菌技术等知识点。 2.解题关键：熟悉微生物操作的基本原理、基本技术和操作流程，明确无菌技术的要素。;【解析】实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株，因此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。纯化分离微生物的方法有3种：平板划线法和涂抹平板法、混合平板法；灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌。 答案：(1)原油 选择 (2)平板划线法 涂抹平板法(或混合平板法) (3)强 (4)干热灭菌 湿热灭菌(或高压蒸汽灭菌) 火焰;【互动探究】(1)若在该培养基中加入青霉素，能更好地起到筛选作用吗？ 提示：不能。 分析：青霉素培养基往往是真菌选择培养基，在加青霉素的培养基中，细菌生长被抑制，因而不能筛选出能高效降解原油的菌株(细菌)。;(2)细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌？ 提示：培养基、手、接种环。 分析：高压蒸汽灭菌的设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。.;微生物的分离、培养和数量测定 1.筛选菌株 (1)原则：人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 (2)菌株筛选原理的比较：;;2.统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法： ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 ②方法：用计数板计数。 ③缺点：不能区分死菌与活菌。;(2)间接计数法(活菌计数法)： ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式：每克样品中的菌株数=(C÷V)×M，其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 ③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～