2014届高三生物一轮复习课件:无菌操作技术实践 苏教版选修1 PPT.ppt

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2014届高三生物一轮复习课件:无菌操作技术实践 苏教版选修1 PPT

第一章 无菌操作技术实践;一、微生物的培养 1.培养基 (1)概念:为人工培养微生物而制备的,提供适合微生物_______ ______或积累____________的营养基质。 (2)种类: ①按照物理状态可分为:_____培养基、半固体培养基和_____培养 基。 ②按化学成分可分为:___________、合成培养基和半合成培养基。 ③按功能可分为:基础培养基、___________、鉴别培养基等。;2.无菌操作与接种技术 ___________ (1)灭菌的方法 干热灭菌 ___________:如高压蒸汽灭菌法 (2)无菌操作与接种技术: ①无菌操作——微生物接种技术的关键: a.培养基、试管、培养皿、接种器械在接种前都需要_____。 b.操作人员及操作环境要求_______。;划线接种;3.培养基的配制 (1)配制原则:为所培养微生物的________________提供所需的 _______________。 (2)配制过程: 配制培养液→________→分装→包扎→灭菌__________ 。 【点拨】灭菌可杀死所有微生物,消毒只杀死微生物的营养细 胞,常用的消毒方法有70%的酒精消毒、紫外线消毒等。;【点拨】微生物计数培养时常设置对照实验:(1)判断培养基是否有杂菌污染,可将未接种的培养基同时进行培养;(2)判断选择培养基是否有筛选作用,可设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养。;种 类;2.涂抹平板法和混合平板法的异同 (1)过程如图:;(2)结果不同: ①涂抹平板法:细菌菌落通常仅在平板表面生长。 ②混合平板法:细菌菌落出现在平板表面及内部。 (3)目的相同:分离各种目的微生物。;3.常见的消毒和灭菌方法;内容;【典例训练】(2011·新课标全国卷)有些细菌可分解原油,从而消除由原油泄漏造成的土壤污染,某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题: (1)在筛选过程中,应将土壤样品稀释液接种于以____为惟一碳源的固体培养基上,从功能上讲,该培养基属于__________培养基。 (2)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即_________和_________。 (3)为了筛选出高效菌株,可比较单菌落周围分解圈的大小,分解圈大说明该菌株的降解能力_________。;(4)通常情况下,在微生物培养过程中,实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_____和______。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_______附近进行,以避免周围环境中微生物的污染。 【解题指南】 1.考查实质:本题以筛选菌株为情境考查培养基的配制、接种方法、无菌技术等知识点。 2.解题关键:熟悉微生物操作的基本原理、基本技术和操作流程,明确无菌技术的要素。;【解析】实验目的是为了筛选出可以分解原油的高效菌株,因此在筛选的时候选择培养基的碳源为原油。纯化分离微生物的方法有3种:平板划线法和涂抹平板法、混合平板法;灭菌的方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌。 答案:(1)原油 选择 (2)平板划线法 涂抹平板法(或混合平板法) (3)强 (4)干热灭菌 湿热灭菌(或高压蒸汽灭菌) 火焰;【互动探究】(1)若在该培养基中加入青霉素,能更好地起到筛选作用吗? 提示:不能。 分析:青霉素培养基往往是真菌选择培养基,在加青霉素的培养基中,细菌生长被抑制,因而不能筛选出能高效降解原油的菌株(细菌)。;(2)细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌? 提示:培养基、手、接种环。 分析:高压蒸汽灭菌的设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧,可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环。.;微生物的分离、培养和数量测定 1.筛选菌株 (1)原则:人为提供有利于目的菌生长的条件,同时抑制或阻止其他微生物的生长。 (2)菌株筛选原理的比较:;;2.统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法: ①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 ②方法:用计数板计数。 ③缺点:不能区分死菌与活菌。;(2)间接计数法(活菌计数法): ①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。 ③操作:设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~

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