at和ddimer检测的临床应用安庆 PPT.pptx

AT和D-dimer检测的临床应用 单卫民苏州大学附属第二医院2011.05.14 24.5%14.2%12.5%9.0%6.3%5.1%血栓疾病的流行病学数据世界人口死亡原因分析(WHO statistics) 血栓性疾病 感染 癌症 意外事故 肺部疾病 艾滋病血栓疾病的流行病学数据国内资料报道：在40岁以上的人群中心肌梗死的年发生率为39.7/100 000～64.0/100 000；脑卒中的年发生率为109.7/100 000，这证明血栓性疾病在中国属于常见病。血栓性疾病中，静脉血栓占70％左右，动脉血栓占30％左右。根据尸解资料显示，静脉血栓占40%～60%,但只有11%～15%被临床诊断。动脉血栓更易被忽视（vWF、血小板功能等检测缺乏）。血栓栓塞性疾病妇产科骨科血管外科普通外科创伤外科介入科神经外科血栓动脉及静脉外科和内科呼吸科泌尿外科神经科心胸外科心脏科老年科ICU内分泌儿科肿瘤科血液科肾病科 凝固抑制内源途径外源途径XIIVIIXI组织因子IXVIII蛋白 C 系统X抗凝血酶VII纤维蛋白原纤维蛋白凝块抗凝血酶(AT)检测抗凝血酶活性测定(发色底物法)原理： 在待测血浆中加入过量的凝血酶，凝血酶与血浆中的AT形成1:1的复合物，剩余的凝血酶作用于显色肽，裂解出显色基团，显色程度与剩余凝血酶的量呈正相关，而与血浆AT:Ag呈负相关。参考值： 108.5±5.3%AT:Ag含量测定(ELISA法)原理： 将抗AT抗体包被在固相板，标本中的AT与固相的抗AT抗体相结合，再加入酶标记的抗AT抗体，形成抗体-抗原-酶标记抗体的复合物，加入显色剂后，根据显色的深浅来判断标本中AT的含量。参考值： 290±30.2mg/L抗凝血酶检测的临床意义 AT缺乏是发生静脉血栓与肺栓塞的常见原因之一，但与动脉血栓形成关系不大。一.遗传性AT缺乏： 遗传性AT缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病，患病率约1/5000,发病多在19-25岁，患者常在手术、创伤、感染、妊娠或产后发生静脉血栓，并可在多出反复发生血栓。此病可分为两型：1.交叉反应物(cross reaction material)阴性型(CRM?），即抗原与活性均下降；2. (CRM ? ）型，即抗原正常，活性下降（结构异常）。 共同表现是对肝素的亲和力降低，从而对凝血酶的灭活能力明显减弱。二.获得性AT缺乏：1.合成降低，主要见于肝硬化、重症肝炎、肝 癌晚期等。2.丢失增加，见于肾病综合征。3.消耗增加，见于血栓前期和血栓性疾病，如 心脑血管疾病、DIC、外科手术后、深静脉 血栓形成、肺梗死、妊高症等。三.AT水平增高： 在血友病、口服抗凝药物、使用黄体酮类药物时，AT水平增高。 α- chainFp AFp BDDEFp BFp Aα- chainD-二聚体的产生纤维 蛋白原的构造α- chainα- chainFp AFp BDDEDDEFp BFp Aα- chainα- chainFp AFp BFp BFp AFibrinopeptidesFibrin monomer由纤维蛋白原生成的纤维蛋白单体FibrinogenThrombinXIIIaCaDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDDEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEEE由纤维蛋白单体生成的稳定型纤维蛋白稳定型纤维蛋白DDDEDDEDDDDDDEEEEDDDDDDEEDDDDEDEEEDDDDEDDEEEDDDDDEDEDDDDDD/EDY/YDYY/DXDEE纤维蛋白的分解交联纤维蛋白降解混合物纤维蛋白（fibrin）PlasminD-D是混合物中的最小片段FDP (源于纤维蛋白) Ｄ二聚体α- chainFpAFpADDEFpBFpBα- chainDDEＸ碎片X　fragmentDDED碎片D fragmentＹ碎片Y fragmentDED碎片D fragmentE碎片E fragment纤维蛋白原的分解Plasmin纤维蛋白原PlasminPlasminFgDP (源于纤维蛋白原)现有D-dimer 检测存在的问题 手工乳胶凝集法 半定量 试剂用量大 (多次稀释步骤) 成本高 灵敏度不足和不精确度高 ELISA D-dimer 实验 定量 精密度、敏感度、特异性高 试剂用量少 实验步骤耗时，不适合作“一线”诊断实验使用D二聚体标准——中国国家标准(讨论稿）4.2 阴性预测值 结合临床诊断的验前概率进行D-二聚体检测，其阴性预测值应不低于95%。4.3 测试范围 涵盖制造商提供的用于排除诊断的临界值的1/2到4倍的临床标本测定值。4.4 线性 D-二聚体试剂在测试范围内，线性相关系数应大于0.98