利用正交试验法优化团花不定芽分化培养基-江苏农业科学.PDFVIP

— ７８— 江苏农业科学　２０１６年第４４卷第６期 黄　浩，蒙爱东．利用正交试验法优化团花不定芽分化培养基［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（６）：７８－８１． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１６．０６．０１９ 利用正交试验法优化团花不定芽分化培养基 黄　浩，蒙爱东 （广西药用植物园，广西南宁５３００２３） 　　摘要：为了获得团花不定芽分化的最佳激素组合和外植体类型，以团花２０～３０ｄ无菌苗的子叶、下胚轴和真叶为 ４ 外植体材料，采用Ｌ（３）正交试验表，２，４－Ｄ、２－ｉＰ、６－ＢＡ为正交试验的３因素，进行直接诱导不定芽分化试验。 ９ 结果表明，以真叶为外植体，不定芽分化率最高，为７３．３％，激素组合为ＭＳ＋０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋１．０ｍｇ／Ｌ２－ｉＰ＋ １．５ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ；下胚轴的不定芽分化率次之，最高为６６．６％；子叶的不定芽分化率最低，最高值仅为４０．０％。试验 结果可为工厂化生产优良团花种苗，并可为团花遗传转化研究奠定基础。 　　关键词：团花；组织培养；正交试验；不定芽 　　中图分类号：Ｑ８１３．１　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０６－００７８－０３ 　　团花［Ｎｅｏｌａｍａｒｃｋｉａｃａｄａｍｂａ（Ｒｏｘｂ．）Ｂｏｓｓｅｒ］为茜草科 成熟、饱满的团花种子，采自广西药用植物园本草纲目 （Ｒｕｂｉａｃｅａｅ）团花属（ＮｅｏｌａｍａｒｃｋｉａＢｏｓｓｅｒ）植物，为亚洲热带 园。经洗净晾干后于低温种子柜保存。 十分罕见的阔叶速生树种。由于团花生长迅速，树干通直，因 ＮａＣｌＯ溶液５００ｍＬ塑料瓶包装，天津市津宇精细化工有 而被誉为“奇迹树”，早在２０世纪７０年代就受国内外普遍关 限公司生产；灭菌工作溶液配制：将５０ｍＬＮａＣｌＯ原液加入到 注。其木材淡黄色，纹理通直，不易开裂和变形，是较好的家 ９５０ｍＬ无菌水中摇匀；２，４－Ｄ、２－ｉＰ、６－ＢＡ、琼脂、蔗糖购自 具、建筑装饰等用材。早在印度古医“阿优吠陀”经中，就有 北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司。 用树皮治疗疾病的记载；树皮含有丰富的生物碱类，其中 １．２　方法 ３ －二氢卡丹宾和３－二氢卡丹宾为治疗高血压药物“钩藤 １．２．１　浸种和无菌幼苗的获得　用小袋包好种子，放入装有 α β 总碱”的有效成分，具有强而持久的降压作用，其效价已经接近 约１００ｍＬ无菌水的２５０ｍＬ玻璃组培瓶中，在３７℃恒温振荡 ［１］ 利血平 。树叶含较高蛋白质，可作动物饲料；花是良好的蜜 箱振荡浸泡２４ｈ。在无菌超净台上，将包着种子的小袋浸于 ［２－４］ 源。因用途广泛而具有较高开发价值和较大应用前景 。 ＮａＣｌＯ工作溶液中灭菌１５ｍｉｎ，再用无菌水彻底冲洗５次，最 ［５］ 团花在中国仅有１种 ，主要分布于广东、广西、云南海 后将种子播于不含任何激素的ＭＳ培养基中（培养室温度为 拔５０～１１００ｍ的山谷溪旁或杂木林下；在云南省海拔 （２５±２）℃，诱导不定芽分化时前３０ｄ采用暗培养，之后进行 １０８０ｍ以下的亚热带地区有集中分布［５－６］，喜温不耐寒。国 光培养（光周期为 １４ｈ），人工光照强度２０００ｌｘ。）２０～３０ｄ 内外学者主要开展团花的树皮药用成分［１，７－１１］、引种和栽 后，即可得到含１对子叶和第 １对真叶、高度为５～１０ｍｍ的 培［１２－１８］生物技术［１９－２１］研究，并取得较好的进展。尽管利用 无菌苗。 大田苗顶芽或侧芽通过以芽繁芽的组织培养方式［２２－２３］进行 １．２．２　外植体的获得　外植体分别为无菌苗子叶、真叶、下 团花植株再生研究已