江南大学13年微生物综合真题答案.doc

2013年微生物食品 一 名词解释 15×3共45分 1 微荚膜 2 脂多糖 3 嗜菌斑 4 主动运输 5 同型乳酸发酵 6 巴氏消毒 7 质粒 8 抗性突变株 9 微生态制剂 10 拮抗 11 BOD：生化需氧量，在特定的时间及温度条件下，微生物氧化水中有机物所消耗的氧量，单位mg/L。 12 半抗原 13 食品卫生指示菌一般将大肠菌群、粪链球菌、产气荚膜杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等作为指示菌，其中以大肠菌群指数（亦称大肠杆菌指数）最常使用 14 诱导酶 （第十五个没记下来，大家谅解啊） 二 图解题 5×6共30分 1 烈性噬菌体五步生活史 2 细菌的一般结构和特殊结构 3 暗修复 4 D值 Z值及之间的关系 5 间接ELISA法 三 简答题 3×10共30分 1 简述青霉素和溶菌酶对细菌的作用机制 2 什么是选择性培养基请举一例说明作用 3 分析一下情况出现的原因并提出解决方案 （1）食用油与奶粉中检出黄曲霉毒素 （2）面包中心发粘并呈拉丝状（1）。 防止：控制面包烘制中的水分。 四 论述题 3×15共45分 1 以枯草芽孢杆菌为出发菌种，涉及一种通过育种选育D-丙氨酸缺陷型菌株1. 诱变菌株培养：将枯草芽孢杆菌接种肉汤培养基，培养至对数期，低温诱导同步生长，转接新鲜肉汤培养基，培养30-50min，离心收获细胞。 2. 诱变菌悬液制备：1）选择生理盐水或缓冲液做介质 2）用玻璃珠震荡分散，然后脱脂棉过滤是细胞处于分散状态 3）调节大肠杆菌密度在108个/ml 3. 诱变处理：采用紫外线照射，选择15w紫外线灯管，培养皿底部离灯管30cm左右，培养皿要放平，处理前应先开灯20-30min 预热处理； 4. 后培养：将经诱变处理的菌株接种于完全培养基培养 5. 淘汰野生型：将后培养的细菌先MM洗涤，接着用无氮MM培养4-6小时，然后将细胞转入正常浓度氮源的MM中并加入5000-1000ug/ml的青霉素，培养不同的时间（12-24h），取样分别涂布MM和CM平板，菌落数差异大的浓缩效果好。其原理是青霉素能抑制细菌细胞壁的生物合成，因而可杀死能正常生长繁殖的野生型细菌，但无法杀死正处于休止状态的营养缺陷型细菌，从而达到浓缩后者的目的。 6. 检出 缺陷型：影印检出法，在MM平板上不生长，而在CM平板上生长的即为缺陷型。 7. 缺陷型鉴定：将待测枯草芽孢杆菌从生长斜面上用无菌生理盐水洗下，离心收集沉淀物用生理盐水洗涤后制成浓度为个细胞106-108个细胞/ml悬浮液，取0.1ml涂布在MM上，用直径0.5cm的滤纸片蘸取实验物质的溶液，用镊子放到含菌体平板的四个相应位置，观察其生长情况，若在蘸有D-丙氨酸D-丙氨酸 2 简述科赫法则。一幼儿园的小朋友们食用冷冻草莓后出现集体性腹泻，请分析病原菌是什么，为什么会发生感染，并检出。科赫法则 纯培养物接种到某个未经免疫的正常个体内时，应出现同一病症。 （4） 该病原体应从同一病症受感染的新患者体内重新分离出来。 病原菌可能是金黄色葡萄球菌，沙门氏菌等，可能是在冷冻草莓加工过程中病原菌没有被完全杀死，所以当外界环境适宜时又会大量生长繁殖。 检出方法：取患者的呕吐物或排泄物在肉汤培养基中37℃培养24h，再用平板划线分离的方法得到病原菌的纯培养物，用纯培养物去感染正常的群体，如果出现同一病症，且能从这些感染人群排泄物分离出致病菌，再进行菌种鉴定，即可检出病原菌。 3 列举并叙述影响食品中微生物生长的理化因素和生物因素，并举两例说明其在食品保藏中的作用。 1）温度对微生物的影响 膜的液晶结构 酶和蛋白质的合成和活性 RNA的结构及转录 2）微生物的生长温度范围 最低生长温度：微生物能够生长的最低温度 最高生长温度：微生物能够生长的最高温度 最适生长温度：微生物生长速率最大时的温度 致死温度：在10分钟内，微生物被完全杀死的最低温度。 微生物生长温度类型 嗜冷微生物：能在0℃以下生长的微生物。 分布：地球两极地区的水域和土壤中 嗜温微生物：最适生长温度在25~37℃之间 自然界绝大多数微生物属于嗜温微生物。 嗜热微生物：最适温度在50 ~60 ℃左右 极端嗜热微生物/嗜高温微生物：最适生长温度在80℃以上，已发现的全都是古生细菌。 1.2水活度 水活度（aω）：在相同温度、压力下，体系中溶液的水蒸汽压(P)与纯水的蒸汽压(P0)之比，即aω=P/P0 1）干燥对微生物的影响：使代谢停止，使微生物处于休眠状态，严重时细