猪Mx1+cDNA分子的克隆、表达和鉴定.pdf

闻静：猪MxleDNA分子的克隆、表达和鉴定 1 猪Mxl cDNA分子的克隆、表达和鉴定 研究生：闻静 导师：孙怀昌教授 捅要 Mx蛋白是GTP酶发动蛋白超家族成员，是干扰素诱导产生的关键抗病毒蛋 白。Mx蛋白能抑制许多病毒的复制，包括单链RNA病毒、双链RNA病毒以及反 转录病毒复制周期的早期阶段。Mx蛋白有细胞核和细胞浆两种形式，啮齿类Mxl 蛋白在胞核积聚，人的MxA、啮齿类的Mx2和猪的Mxl蛋白定位于胞浆。胞核 内的Mx蛋白对甲型流感病毒等细胞核内复制的病毒具有抑制作用，而胞浆内的 Mx蛋白能抑制水泡性口炎病毒、布亚病毒等胞浆内复制病毒的增殖。 的抗病毒活性未见报道。本研究从经IFN．a处理的猪外周血单个核细胞提取总 RNA，根据己发表序列设计引物，用RT-PCR扩增得猪MxlcDNA。序列测定结 果显示，与已发表的猪MxlmRNA的核苷酸序列同源性为99．5％，氨基酸序列同 源性为98．9％。将猪Mxl 表达载体pcDNA．Mxl。将猪Mxl 性口炎病毒感染，通过空斑形成减少试验证明表达的Mxl蛋白具有抗病毒活性， 为Mx蛋白生物学功能的进一步研究和应用奠定了基础。 关键词：猪MxlcDNA；克隆；杆状病毒表达；抗病毒作用 扬州大学硕士论文 2 一 of andIdentificationPorcineMxl Cloning，Expression cDNA M．D．Candidate：Wen Jing Supervisor：Prof．SunHuaichang Abstract Mx aremembersofthe of are GTPases，which proteins dynarninsuperfamilylarge and oftheantiviralstateinducedinterferonsan role keycomponents by playimportant viruses inantiviralinfectionsawide of by range includingnegative-sense RNA RNA viruses，double-stranded single·stranded viruses，positive·sense RNAvirusesandthe DNAvirusat of single··stranded re