质谱质谱基础 仪器 应用.ppt

dsd Controlled Ion Fragmentation on the 4700 Control of laser intensity, gas on or gas off option Control of collision energy (0 ~ 3 keV) Control of collision gas pressure with a choice of up to four different collision gases All controls available in both manual and automated TOF/TOF has no theoretical mass limit for precursor selection Glu1 Fibrinopeptide B EGVNDNEEGFFSAR “No Gas” “Gas On” No Gas Gas Internal 40 72 Immonium 6 8 N-Term 21 18 High Eng 1 11 C-Term 30 32 Total 98 141 Sum of Intensities Number of Peaks 四、傅立叶变换离子回旋共振质谱(Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance Mass Spectrometry, FTICRMS) 内部校正，稳定 外部，内部，非常稳定 校正 宽扫，低分辨 窄扫，高分辨 宽扫，高分辨 子离子 母离子 子离子 母离子 扇形磁质谱仪(非杂化型) FTICRMS 性质 5,000典型 10,000可得到 50,000~200,000典型 2,000,000可得到 分辨率 1000典型 10,000~100,000 低的ppm (内部校正) 低的ppm (外部校正) 亚ppm (内部校正) 精度 10~100ppm 低的ppm (外部校正) 亚ppm (内部校正) 需配置更多的电场或磁场 多种提供能量的方式 MS/MS/MS 低于Femtomole Picomole 不可能 低的Femtomole 低的Femtomole 低的Femtomole 灵敏度(ESI) 不易实现高分辨 1个谱/秒，高分辨和高灵敏 LC/MS 少见 连用容易，高分辨和高灵敏 MALDI 不可以 可以 离子-分子反应 FT-ICR-MS性能 Quench Ionize Excite time Detect Select Excite Collision Gas Pulse Fragmentation and Pumping Delay FTMS MS/MS 脉冲序列 FTICRMS的质谱/质谱是时间序列的串联，与离子阱相似。 母离子获取能量进而分解的方式很多： 碰撞诱导解离(SORI-CID)。 红外多光子解离(IRMPD)。 紫外光解离(UVPD)。 电子捕获解离(ECD)。 黑体红外辐射解离(BIRD) 。 1、持续非共振辐射-碰撞诱导解离法(Sustained Off-Resonance Irradiation – Collisional Induced Dissociation, SORI-CID) 引入脉冲N2，当Cell中的压力达到10-6Torr时，施加一非共振射频(RF)给离子加速。该射频一般设定在低于感兴趣的前体离子的回旋频率1000Hz左右。当回旋频率与射频相位接近相同时，离子获得能量并使其回旋半径加大。从另一方面，当二者的相位相差180o时，离子向回旋池中心运动，回旋半径减小。这样的循环发生每秒发生几百次，某些循环会使离子回旋加快，与氮气碰撞获得一个小的能量，并转化为内能。每次碰撞，离子只能得到一个很小内能，但这样的碰撞发生千百次，最终使离子积累到足够高的内能进而分解。 由于离子的内能是逐步积累升高的，该内能将遍及全部离子，进而离子以低能碎裂途径分解。 上述过程中，只有回旋频率接近于RF的频率的离子才能被激发，该离子的碎片离子不具要类似的回旋频率，它们不会被进一步的激发，也不能与氮气碰撞获得内能，进而得以冷却成稳定的离子。所以，碎片离子一旦形成，便会在回旋池中得到冷却，不会进一步发生碎裂反应。 SORI-CID是一个低能的碰撞诱导解离反应，但不产生多次断裂反应，精度高。 Time evolution of ion cyclotron radius (left) and ion xy trajectory (right) for each of three ICR techniques for ion multiple activation