除草剂的生物测定PPT.pptVIP

《农药生物测定》多媒体课件 2.4 芽期抑制型药害 酰胺类(都尔、敌稗等)土壤处理除草剂，使作物幼芽、幼根吸收，敏感作物芽畸形死亡，已出土的幼苗心叶扭曲、萎缩，其它叶片皱缩、变黄。 苗心叶萎缩 （三）实例 1、黄瓜幼苗形态法：是测定激素类除草剂及其他植物生长调节剂活性的常用方法，具有反应灵敏、测定范围大（0.1-l000μg/mL），操作简便等优点。 （1）药剂配制：将2,4-D配制成一系列浓度的丙酮溶液； （2）发芽床制作：用1张直径11cm滤纸在药液中浸至饱和，取出挥发掉丙酮，放入直径12cm培养皿中，再在其下垫两张同样大小空白滤纸。 （3）种子消毒： （4）培养：每皿放入20粒，加入12mL蒸馏水（此时培养皿中的实际浓度比原来丙酮液浓度低10倍)。盖好皿盖，置25℃恒温箱中黑暗培养。 （5）形态描述、绘图、照相等：6天后取出观察黄瓜幼苗，描述、绘制、照相或印相各浓度下黄瓜幼苗的形态。 一、种子发芽测定法 2、小杯法：可测定二苯醚类、酚胺类和氨基甲酸酯类、氯代脂肪酸类等除草剂的活性，但对抑制植物光合作用的除草剂则几乎不能采用。该法具有操作简便，测定周期短、范围较广的优点。 一、种子发芽测定法 试材选用小麦、油菜、水稻、稗草等。以直径3.5cm，高5.0cm的玻璃杯或50mL的小烧杯为容器。杯底放一张圆滤纸片，吸取一定量的有机溶剂溶解的待测药液倒入杯内，挥发干溶剂。若以水稻、稗草等水生杂草种子为试材，在杯中加入2mL蒸馏水，若以小麦、油菜种子为材料时，则滤纸片底下放一层直径约为0.5cm大小的玻璃珠，再加入3mL蒸馏水。选择刚萌动的种子10粒，排放到滤纸片上，置28℃恒温室中培养，白天给予日光灯照。培养期间每天加入一定量蒸馏水补充挥发掉的水分。3 d后分别记载株高或测定鲜重。计算抑制生长50%所需要的浓度（EC50）。 （三）实例 2、小杯法 一、种子发芽测定法 药效的分级标准为： 0级 同对照 1级 抑制生长25%以下 2级 抑制生长50%以下 3级 抑制生长75%以下 4级 抑制生长75%以上 然后计算每一浓度处理的抑制指数： 抑制指数＝ ∑（级别×各级代表株数） 总株数×4（最高级别） ×100 将抑制指数（抑制百分数）转换为机率值，浓度（剂量）以对数值表示，求出EC50。 （三）实例 （三）实例 3、高粱法 4、稗草胚轴中胚轴法 一、种子发芽测定法 （一）试验方法 　　将所选试材进行催芽处理后，种植在含有供试药剂的基质中（液体基质或土壤）或在植株生长的某个适期施药，经一定时间、一定条件的培育后观察试验结果。 二、植株生长量测定法 第三节　除草剂生物测定技术 （二）实例 1、去胚乳小麦幼苗法：适用于测定光合作用抑制剂。 （1）选种：选择饱满度一致的小麦种子 。 （2）浸种催芽：浸种2h后，排列在铺有滤纸或纱布的搪瓷盘中，在室温20℃左右进行催芽，3~4d后苗高达2~3cm。 （3）3-4d后精选高度一致的幼苗，轻轻取出，避免伤害根部，然后用镊子摘除胚乳，再用水漂洗掉附在上面的胚乳成分，准备种植。 （4）用直径4.5cm、高5cm小玻璃杯为测定容器，每杯注入不同浓度供试药液3mL和稀释10倍的培养液6mL，每杯插入上述去胚乳小麦10株。 （5）在室温21~26℃左右和光照下培养6~7天后观察药效。注意每天应该给每个小杯称重，补足损失的水分。 （6）测量每株从芽鞘到最长叶尖的距离，求生长抑制率，继而求EC50。 生长抑制率（%）＝(对照生长量－处理生长量)/对照生长量×100 二、植株生长量测定法 2、萝卜子叶法 3、番茄水培法 4、叶鞘滴注法 5、再生苗测重法 （二）实例 1、去胚乳小麦幼苗法　　 二、植株生长量测定法 （一）藻类实验法：应用绿藻 (chlorophyta)，蓝藻 (cyanophyta)等微小的藻类进行有关除草剂实验的实例很多，其中小球藻法是最为普遍的一种方法。 （二）浮萍法： （三）圆叶片漂浮法：植物在进行光合作用时，叶片组织内产生较高浓度的氧气，使叶片容易漂浮，而若光合作用受抑制，不能产生氧气，则叶片就难以漂浮。 三、生理生化指标测定法 第三节　除草剂生物测定技术 利用植株在施药后的生理生化反应来作为测定的指标，亦被广泛应用，特别是近年来由于生理生化技术发展，使这一方法更为准确和灵敏。 　　1、藻类培养——培养基的选择与制备； 　　2、试验法——用偏平烧瓶或三角瓶，将小球藻培养液分别定量加入三角瓶中，再定量加入一定浓度的除草剂。可通入一定流量的含3%CO2浓度的空气，也可用二层纱布封住三角瓶口。25℃下，荧光灯照明培养。 　　3、测定方法 　（1）观察颜色变化：施药后5