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食用菌制种技术PPT
三、菌种的制作 (一)母种的制作 1、母种培养基 ①PDA培养基:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克, 琼脂20克,水1000亳升,PH值自然。适合以一 般母种的培养 ②. PDA加富培养基:去皮马铃薯200克,麦麸100克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000亳升,PH值自然。适合母种的复壮培养。 ③. PDA综合培养基:去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,磷酸二氢钾3克,硫酸镁1.5克,维生素B15—10mg,水1000亳升,PH值自然。适合草菇、灵芝、猴头菇、茯苓母种的培养。 ④ . 母种保藏培养基:在PDA培养基中加10g蛋白胨。 粉状 条状 属天然植物多糖?融点96℃以上凝点40 ℃以下冷水中不溶透明度好、粘着力强不被微生物分解利用 特性 2、 母种培养基的制备 PDA培养基: 去皮马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂15-20g、水1000ml 马铃薯去皮,切片,称取200克,沸水煮20-30分钟,过滤,取滤汁添水至1000ml,加葡萄糖或蔗糖20克、琼脂15-20克煮熔,pH自然,常规灭菌即可。 准备工作 称量、材料预处理 按配方准确称量各营养物质。将马铃薯去皮、挖掉芽眼后称量200g,切成1cm见方的小块。琼脂剪碎后用水浸泡。 熬煮 将切好的马铃薯块加适量水后放入电饭锅中,煮至酥而不烂。 过滤、加可溶药物 用双层沙布过滤,取滤汁,放在电饭锅中加 入糖 熬琼脂、定容 在沸腾状态下加入琼脂,直到琼脂完全溶化为止,定容至1000ml。 母种培养基制作流程 1. 分装试管 2. 塞棉塞 3. 打捆 4. 灭菌 5. 摆斜面 (1)、装管:18 mm×180 mm或20 mm×200 mm的玻璃试管,分装量掌握在试管长度的1/4-1/5,原则上是摆放成斜面后,斜面的长度为试管长度的1/2-2/3。 (2)、灭菌:母种培养基灭菌时,需用1.05~1.1 kg/cm2的压强,温度为121℃,灭菌(保持121℃)30 min。 (3)、斜面的摆置:趁热摆好斜面 摆斜面 灭菌结束后锅盖开1/5的小缝,用余热烘干报纸和 棉塞,然后摆斜面。斜面长是试管总长的1/2 3、种菇的组织分离 (1)种菇的选择:外观典型、大小适中、无任何污染、7--8成熟、第1~2茬的子实体。 (2)接种箱与分离工具的消毒 接种箱:科达气雾消毒粉2—3g或高锰酸钾5g,甲醛10ml混合气雾消毒30min. 分离工具的消毒:用70--75﹪酒精擦拭后,再在酒精灯上反复灼烧。 (3)种菇的解剖分离 纵剖(撕)菇体尖头镊取柄盖交界处绿豆粒大的组织放入新斜面中部 金针菇是横切菌盖上薄的菌肉或取未开伞的幼嫩子实体的菌褶片 灵芝组织分离所取的部位是菌盖边缘的白色生长圈 木耳等胶质菌类的菌肉薄,子实体经无菌水反复冲洗后,撕开子实体或用刀片将两层耳片切开,挑取一小块菌肉组织即可。 (4)种菇分离后的观察培养 将分离好的试管放入23--25℃的温箱中培养,24—36h后开始萌发菌丝,2—3d后形成菌落,此时注意淘汰杂菌污染或菌丝生长希弱的试管,10d左右菌丝可长满试管,放入冰箱中储存。 选择适宜的季节做出菇试验。 4、母种的转管培养 母种的接种必须在严格的无菌条件下进行。否则将会造成严重污染,给生产造成造成巨大损失。然后将所有试管及接种器具放入接种箱里进行消毒灭菌,力求灭菌彻底。在点燃酒精灯火焰上进行操作,将菌种试管和接种用斜面培养基放在火焰旁。拨去棉塞,把消毒灭菌的接种针伸入菌种试管内,挑小块 菌种放入斜面培养基中,一支 母种可移栽30—40支试管。原 始母种可转管2—4代。 图3-14斜面试管转管接种 培养:将移接好的试管放入20--25℃的温箱中培养,同时注意反复观察,清杂去劣,经10d左右菌丝可长满试管。 (二)原种的制作 1、原种培养基配方与配制 ① 木屑培养基:木屑78%,麸皮或谷粒20%,石膏1%,磷肥1%,水适量。适用于培养平菇、木耳、香菇、猴头。 ② 棉子壳培养基:棉子壳78%,麸皮或谷粒20%,石膏1%,磷肥1%,水适量。水适量。适用于培养平菇、猴头、金针菇、鸡腿菇。 * * 第五章 食用菌 第一节:制种技术 教学目标、重点、难点 教学目的:熟练使用制种用品、用具、设备、设施进行制种生产。 本节重点:食用菌制种条件,制种工具的使用。 一、 食用菌菌种的概念与级别 (一)、菌种的概念 菌种是指经人工培养并可供进一步繁殖或栽培使用的食用菌菌丝体,常常包括供菌丝体生长的基质在内,共同组成繁殖材料。 菌种是食用菌生产的首要条件,菌种性状的优劣直接影响到生产的成败。常言道:“有收无收在于种(种子),多收少收在于种(栽培)”
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