食用菌栽培01菌种生产PPT.ppt

四、消毒与灭菌 过氧乙酸无色至微黄色液体，有刺激性、腐蚀性、挥发性。 1.5%熏蒸7ml/m3 0.2%洗手 0.5%浸泡 0.5%喷雾 使用 四、消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 （二）表面活性剂 脱水剂脂溶剂蛋白质变性剂 乙醇 70％~75％效果最好 皮肤、器皿擦拭或浸泡 浓度 高浓度效果差 无水的无杀菌作用 四、消毒与灭菌 3.新洁尔灭 0.25%消毒皮肤、浸泡器具0.5%喷雾 酚类 石炭酸：3%~5%浸泡或喷雾 来苏尔 刺激性小效力比苯酚强4倍3%~5%喷雾、擦洗2%消毒手 四、消毒与灭菌 液体消毒灭菌法 （三）重金属盐类 1、氯化汞（升汞）：常用浓度0.1%~0.2%，主要用于食用菌菌种分离 2、硝酸银：0.1%~1.0% 3、硫酸铜：常配制波尔多液 五、接种与培养 母种的接种与培养 接种（转管）： 过程 接种环取绿豆粒大母种移入新斜面中部 注意 种块勿太大 原老种块勿再接入 传代次数勿太多 三、培养基的配制 母种培养基配制过程 煮沸20min，取定量滤液 制马铃薯滤液 滤液沸时加入，融后加余料 融化琼脂 调节pH值 勿污管口，控制装量 分装试管 准备灭菌 包扎成捆 1%NaOH或HCl 三、培养基的配制 母种培养基配制过程 三、培养基的配制 原种、栽培种培养基 棉籽壳培养基 主料 棉籽壳87，麦麸10 辅料 白糖1，石灰1，过磷酸钙1 棉壳、麦麸干混余料溶于水后浇入主料清水翻拌至含水量 配制 三、培养基的配制 原种、栽培种培养基 谷粒培养基 主料 麦粒、玉米粒等98.5% 辅料 石膏粉1%,碳酸钙0.5% 调pH与分装 pH：一般为8.0左右原种培养基装大口瓶栽培种培养基装菌种袋 颗粒洗净，1%石灰水泡胀文火煮沸15~20min晾至无明水后拌入余料 配制 四、消毒与灭菌 基本概念 杀死一切微生物，包括芽孢。 灭菌 分为 杀菌：菌体尚存溶菌：菌体消失 消毒：只杀死病原菌，未伤及芽孢防腐：暂时抑制微生物生长除菌：用冲洗、过滤等法，除去微生物 四、消毒与灭菌 物理消毒灭菌法 热力灭菌 （一）原理 高温 使菌体蛋白质、核酸、酶等凝固或变性失活。 四、消毒与灭菌 物理消毒灭菌法 热力灭菌 （二）方法 湿热灭菌 干热灭菌 四、消毒与灭菌 干热灭菌 热源 火焰及热空气 特点 简便、快速、范围有限 方法 小的金属、玻璃器皿 酒精灯烧 烘箱烤 大的玻璃、金属器皿 四、消毒与灭菌 四、消毒与灭菌 器皿包装→160℃~170℃2h 干燥箱 使用 注意 70℃以下开箱取物勿超180℃随用随开包 四、消毒与灭菌 湿热灭菌 热源 热蒸气或热水 特点 范围广、温度低、效果好、时间短 方法 高压蒸汽灭菌 常压蒸汽灭菌 巴氏消毒 四、消毒与灭菌 蛋白质凝固点与其含水量的关系 蛋白质含水量(%) 凝固温度(℃) 50 25 18 6 0 56 74~80 80~90 145 160~170 热蒸气穿透力大 蛋白质凝固点随其含水量的增加而降低 四、消毒与灭菌 干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较 加热方式 传导介质 温度(℃) 加热时间（h） 透过布层温度（℃） 结果 20层 40层 100层 干热 空气 130~140 4 86 72 70以下 灭菌不完全 湿热 饱和蒸汽 105.3 3 101 10l 10l 灭菌完全 四、消毒与灭菌 高压蒸气灭菌 概念 利用高压产生的高蒸汽温度杀灭微生物的方法 原理 水沸点随热蒸汽压力的增加而升高 密闭锅 蒸气多 压力高 沸点高 四、消毒与灭菌 步骤： 装锅→加热排气→升压→保压灭菌→降压出锅 关键：排净冷空气 注意 灭菌时间和压力因物而异升降压力要稳灭菌时间从保压时算起压力降至“0”才能开盖 使用 四、消毒与灭菌 四、消毒与灭菌 排气 四、消毒与灭菌 纯蒸气压力与温度的关系 1kg/cm2=0.098Mpa(兆帕）=98Kpa（千帕） 四、消毒与灭菌 常压蒸气灭菌 概念 利用常压产生的100℃ 蒸汽温度进行灭菌的方法 特点 设备简，成本低，灭温低，时间长 用法 一次性灭菌（100 ℃，10余h) 尽快达到100 ℃达到100 ℃时开始计时灭菌中勿降温，勿干锅 四、消毒与灭菌 常压蒸气灭菌 四、消毒与灭菌 3.巴氏消毒 概念 利用低于100℃的温度杀灭有害微生物的方法 培养料堆积发酵 料温60℃~70℃杀死有害微生物 方法 四、消毒与灭菌 物理消毒灭菌法 紫外线灭菌 概念 利用电子射过水银气体 产生的紫外线而杀菌的方法 杀菌机理 直接：使蛋白质、酶等变性失活间接：空气中产生臭氧或过氧化氢 使用