hplc法测定不同采收期云南甜柿叶中三种黄酮的含量.docVIP

HPLC法测定不同采收期云南甜柿叶中三种黄酮的含量 　　【摘要】利用回流提取法对不同采收期的云南甜柿叶进行预处理，采用高效液相色谱法测定样品中山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-半乳糖苷和槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷的含量。提取条件为提取溶剂50%乙醇，液固比30∶1，提取3次，提取时间90 min；液相色谱条件为采用ZORBAX Eclipse XDB-C18 （250 mm×46 mm， 5μm）色谱柱分离，甲醇-04%磷酸溶液为洗脱系统进行梯度洗脱，检测波长265 nm；三种黄酮的相对标准偏差均小于1%，平均回收率均在99%以上。该方法具有较好的分离效果和较高的稳定性，适用于用来分析不同采收期的云南甜柿叶中上述三种黄酮的含量，测定结果表明三种黄酮在叶中积累具有规律性，随柿果实成长不断积累，并且果实成熟时达到最高。 　　【关键词】甜柿；高效液相色谱法； 山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷；山奈酚-3-O-β-D-半乳糖苷；槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷 　　【中图分类号】R2842【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2017）08-0020-04 　　Abstract：A HPLC method was developed for determinating the contents of Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside， Kaempferol-3-O-β-D-galactopyranoside， and Quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside in the leaves of Yunnan Diospyros kaki in different harvest periods. The HPLC elution was carried out using methanol-04% phosphate system at a flow rate of 10 mL/min， the injection volume was 10 μL， and the detector wavelength was set at 265 nm. The RSD values of the three flavonoids were all less than 1% and the average recoveries were all above 99%. This method showed good separation effect and high stability， and could be used for determining the contents of the three flavonoids in the leaves of Yunnan Diospyros kaki in different harvest periods. The result showed that the accumulation of them in leaves of Yunnan Diospyros kaki exhibited regularity， and the contents were increasing along with fruit growing. 　　Keywords： Diospyroskaki；HPLC；Kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside；Kaempferol-3-O-β-D-galactopyranoside；Quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside. 　　柿子?槭潦骺疲?Ebenaceae）柿树属（Diospyros）植物柿Diospyros kaki的果实，是我国五大水果（葡萄、柑橘、香蕉、苹果、柿子）之一[1]。近年来在各地均有大面积种植，市场上也出现了多种资源再利用的深加工产品。柿叶是大规模种植后产生的可持续利用资源，因其富含多种活性成分和营养成分而倍受关注 [2-4] 。云南是甜柿水果规模化种植大省，甜柿叶资源的综合利用尚处于起步阶段，黄酮类成分是其主要功效成分[5]，目前对柿叶中总黄酮的提取工艺研究[6-8]，以及黄酮含量的测定[9-11]的文献较多。但同时检测柿叶中3种常见功效黄酮山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷（1） [12]、山奈酚-3-O-β-D-半乳糖苷 （2） [13]和槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷 （3） [14]尚属首次，具有一定的现实意义。本实验建立了一种HPLC色谱检测方法，用于检测不同采收期新鲜柿叶中三种黄酮类物质的含量，并分析其在叶中积累的规律性，为合理利用柿叶提供科学依据。 　　1仪器与